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[發明專利]一種用于檢測牛源大腸桿菌喹諾酮耐藥基因的分子標記及其應用在審

專利信息
申請號: 201710457779.3 申請日: 2017-06-16
公開(公告)號: CN107227357A 公開(公告)日: 2017-10-03
發明(設計)人: 呂少波;李蘇楊;李卓才 申請(專利權)人: 蘇州喬納森新材料科技有限公司
主分類號: C12Q1/68 分類號: C12Q1/68;C12Q1/10;C12N15/11;C12R1/19
代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司32200 代理人: 樓高潮
地址: 215011 江蘇省*** 國省代碼: 江蘇;32
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摘要:
搜索關鍵詞: 一種 用于 檢測 大腸桿菌 喹諾酮 耐藥 基因 分子 標記 及其 應用
【說明書】:

技術領域

發明屬于分子生物學領域,涉及一種采用分子生物學手段檢測微生物耐藥基因的方法,具體為一種用于檢測牛源大腸桿菌喹諾酮耐藥基因的分子標記及其應用。

背景技術

1922年,細菌學家從鼻涕培養物中發現了一種“溶菌酶”,這便是青霉素的原型。1927年,弗萊明正式發表文章聲明青霉素的發現。但直到1939年澳大利亞人費羅里和德國人錢恩,才發明了青霉素的提純技術,兩年之后青霉素開始正式應用于臨床。從此,細菌性疾病的治療進入了一個新的時代。在之后的數十年里,抗菌藥物家族不斷壯大,新型抗菌藥物不斷被用于感染性疾病的治療,為無數與疾病斗爭的人們帶來了福音。但隨著抗菌藥物的廣泛使用,細菌耐藥性問題越來越嚴重,細菌耐藥突變菌株的出現再一次讓感染性疾病的治療成為世界難題。

有研究表明,人類“超級細菌”——抗甲氧西林金黃色牛源大腸桿菌,其中部分變異菌株是來自于豬的一種新型細菌。全球因各類傳染病平均每年死亡1700多萬人,其中耐藥菌株的廣泛傳播和多重耐藥菌株的出現為其主要原因之一。據報道,1972年墨西哥有1萬余人感染耐氯霉素傷寒桿菌,導致一千多人治療無效死亡;1992年美國有1.3萬余人死于耐藥突變菌的感染。

大腸桿菌是人和動物腸道中最主要的一種共生菌,亦是危害人類及動物健康的重要致病菌,其某些血清型具有強致病性,可引起人類和多種動物發生腹瀉,甚至死亡。由于大腸桿菌并多并發或繼發于其他病毒或細菌性疾病,所以在畜禽養殖中抗菌藥物常常作為飼料添加劑使用,往往會給畜牧業造成嚴重的經濟損失。

發明內容

本發明的目的是:為了克服現有技術的缺陷,獲得一種檢測喹諾酮類藥物對大腸桿菌突變選擇窗的影響,探明牛源大腸桿菌的耐藥現狀及流行的耐藥基因類型的方法,本發明提供了一種用于檢測牛源大腸桿菌喹諾酮耐藥基因的分子標記及其應用。

技術方案:一種用于檢測牛源大腸桿菌喹諾酮耐藥基因的分子標記,所述分子標記及其序列為:P1,SEQ ID NO.1~2;P2,SEQ ID NO.3~4;P3,SEQ ID NO.5~6。

優選的,所述分子標記P1、P2和P3的上游引物5’端進行氨基化修飾并附加10個堿基T。

表1分子標記序列

名稱序列(5’-3’)SEQ ID NO.P1-FNH2-T(10)GCAAACCGGACTACGTCACC1P1-RTCAATCCTCTTCGGAGTTCCC2P2-FNH2-T(10)ACGTCTATGCCAACCGTCCTG3P2-RGCAGTGCCACCGCCAATGTCC4P3-FNH2-T(10)TGTAACACGCAAGCACGATG5P3-RAACCTTCTCCGCCCCGAGT6

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