[發(fā)明專利]一種硫酸魚精蛋白注射液的制備方法，該方法得到的硫酸魚精蛋白注射液及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710457650.2
• 申請日: 2017-06-16
• 公開（公告）號(hào): CN107469070B
• 公開（公告）日: 2020-05-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊秀云
• 申請（專利權(quán)）人: 悅康藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司
• 主分類號(hào): A61K38/17
• 分類號(hào): A61K38/17;A61K9/08;A61P7/04;A61L2/02
• 代理公司: 北京匯思誠業(yè)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11444
• 代理人: 王剛;龔敏

本申請涉及一種硫酸魚精蛋白注射液的制備方法，至少包括以下步驟：將硫酸魚精蛋白提取物溶解于水中得溶液，加酸調(diào)節(jié)溶液pH值為2.5?3.5，然后進(jìn)行除菌過濾得到除菌過濾液，最后進(jìn)行灌封得到硫酸魚精蛋白注射液。在除菌過程中硫酸魚精蛋白幾乎沒有損失，且產(chǎn)物的效價(jià)和細(xì)菌內(nèi)毒素測定滿足藥典規(guī)定，可直接用于臨床。

技術(shù)領(lǐng)域

本申請涉及蛋白質(zhì)精制技術(shù)領(lǐng)域，具體講，涉及一種硫酸魚精蛋白注射液的制備方法，該方法得到的硫酸魚精蛋白注射液，以及該硫酸魚精蛋白注射液的應(yīng)用。

背景枝術(shù)

魚精蛋白是從魚類精子細(xì)胞中提取的一種多聚陽離子肽的硫酸鹽。其具有強(qiáng)堿性基團(tuán)，在體內(nèi)可與強(qiáng)酸性的肝素結(jié)合，形成穩(wěn)定的復(fù)合物，從而使肝素失去抗凝能力。由于該物質(zhì)能與一些蛋白質(zhì)、多肽結(jié)合，可用來與胰島素、促皮質(zhì)激素等形成絡(luò)合物，以制備長效注射劑。

硫酸魚精蛋白生產(chǎn)的主要包括提取、分離及精制三個(gè)步驟。其中，魚精蛋白的提取一般是將成熟雄魚的魚白絞碎，加入稀醋酸溶液，分離出凝聚的精子核，然后采用有機(jī)溶劑沉淀，之后加入無機(jī)酸攪拌一定時(shí)間，棄去廢渣，提取液采用有機(jī)溶劑沉淀，得到魚精蛋白無機(jī)酸鹽粗品。在分離步驟，最常用的方法就是有機(jī)溶劑和硫酸反復(fù)沉淀溶解，逐步去除不同的雜質(zhì)。也有采用蛋白沉淀劑如鎢酸、偏磷酸、磺基水楊酸等進(jìn)行沉淀分離的。

現(xiàn)有技術(shù)最常用的蛋白質(zhì)精制方法是采用色譜柱進(jìn)行純化，主要采用離子交換層析和肝素親和層析。但是，上述方法只能對魚精蛋白進(jìn)行提純，無法直接得到硫酸魚精蛋白注射液。而且魚精蛋白原料為帶菌原料，目標(biāo)產(chǎn)物為無菌水溶液，但該蛋白對熱不耐受，不能對中間產(chǎn)物進(jìn)行熱滅菌。導(dǎo)致在生產(chǎn)硫酸魚精蛋白注射液時(shí)，對生產(chǎn)過程的無菌控制要求極為苛刻，系國內(nèi)藥品生產(chǎn)環(huán)境要求中最高級(jí)別，因此需要簡化該過程的無菌控制，且不影響提純效果，通過提純直接得到硫酸魚精蛋白注射液。

鑒于此，特提出本申請。

發(fā)明內(nèi)容

本申請的首要發(fā)明目的在于提出一種硫酸魚精蛋白注射液的制備方法。

本申請的第二發(fā)明目的在于提出該方法得到的硫酸魚精蛋白注射液。

本申請的第三發(fā)明目的在于提出該硫酸魚精蛋白注射液的應(yīng)用。

為了完成本申請的目的，采用的技術(shù)方案為：

本申請涉及一種硫酸魚精蛋白注射液的制備方法，至少包括以下步驟：

(1)將硫酸魚精蛋白提取物溶解于水中得溶液，加酸調(diào)節(jié)溶液pH值為2.5-3.5；

(2)對步驟(1)得到的溶液進(jìn)行除菌過濾，得到除菌過濾液；

(3)對步驟(2)得到的除菌過濾液進(jìn)行灌封，得到所述硫酸魚精蛋白注射液。

優(yōu)選地，步驟(1)中，將所述提取物溶解于水中，得到濃度為10-30g/L，優(yōu)選為20g/L的溶液。

優(yōu)選地，步驟(1)中，pH值調(diào)節(jié)完成后，向所述溶液中補(bǔ)水，稀釋至濃度為5-15g/L，優(yōu)選為10g/L，然后進(jìn)行步驟(2)。

優(yōu)選地，所述步驟(2)至少包括以下步驟：

(2a)第一次除菌過濾：采用孔徑為0.22μm的除菌濾芯對所述溶液進(jìn)行過濾，得到第一過濾液；

(2b)第二次除菌過濾：采用孔徑為0.22μm的除菌濾芯對所述第一過濾液進(jìn)行過濾，得到第二過濾液；

(2c)第三次除菌過濾：采用孔徑為0.2μm的除菌濾芯對所述第二過濾液進(jìn)行過濾，得到第三過濾液；

(2d)第四次除菌過濾：采用孔徑為0.2μm的除菌濾芯對所述第三過濾液進(jìn)行過濾，得到所述除菌過濾液。

優(yōu)選地，步驟(2a)和(2b)中，所述過濾壓力≤0.2mpa。