[發(fā)明專利]一種利用腺苷代替ATP進(jìn)行酶促反應(yīng)的生產(chǎn)方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201710453365.3 | 申請(qǐng)日： | 2017-06-15 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN109136309B | 公開（公告）日： | 2023-01-13 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 劉珊珊;劉輝;周穩(wěn)文;秦永發(fā) | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 北京天開易達(dá)生物科技有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12P19/32 | 分類號(hào)： | C12P19/32;C12P13/12;C12P19/02;C12P17/10;C12P13/04;C12N9/00;C12N15/70 |
| 代理公司： | 北京中珒知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11806 | 代理人： | 王中 |
| 地址： | 100070 北京市豐臺(tái)*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 利用 腺苷 代替 atp 進(jìn)行 反應(yīng) 生產(chǎn) 方法 | ||
1.一種酶促法生產(chǎn)磷酸肌酸的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)在反應(yīng)罐中合成磷酸肌酸的反應(yīng)：
在反應(yīng)罐中，100L的反應(yīng)體系為含有底物2.0kg肌酸，以及0.2kg腺苷、1.8kg多聚磷酸鈉、0.4kg氯化鉀、0.5kg六水氯化鎂和0.3kg磷酸氫二鈉的溶液，配制時(shí)均勻攪拌防止出現(xiàn)沉淀，調(diào)節(jié)pH值至7.0，在反應(yīng)體系中添加肌酸激酶1000U/L、PPK酶500U/L、ADK酶500U/L及AK酶500U/L開始反應(yīng)，反應(yīng)期間控制pH值為7.0，溫度為35℃；
(2)在過濾器中分離肌酸激酶、ATP再生酶和AK酶：
通過超濾方法，將步驟(1)的反應(yīng)體系的反應(yīng)液經(jīng)過過濾器分離肌酸激酶、ATP再生酶和AK酶，過濾器內(nèi)裝膜包，濾出液為分離出酶之后的反應(yīng)液，含有磷酸肌酸、ATP、ADP、AMP及鹽等物質(zhì)，可通過離子交換層析方式進(jìn)一步純化；
檢測(cè)到回收的肌酸激酶、PPK酶、ADK酶和AK酶的活性較反應(yīng)前減少5％-20％，添加相應(yīng)新酶后再次用于步驟(1)反應(yīng)。
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