[發(fā)明專利]牡蠣中生物活性成分集成提取方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710450723.5
• 申請日: 2017-06-15
• 公開（公告）號: CN107319400A
• 公開（公告）日: 2017-11-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃磊;宋志鳳
• 申請（專利權(quán)）人: 大連豪翔生物酶工程有限公司
• 主分類號: A23L17/20
• 分類號: A23L17/20;A23L17/40;A23L17/50;A23L33/00
• 代理公司: 北京科家知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11427
• 代理人: 陳娟

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及牡蠣中生物活性成分集成提取方法，屬于生物科技領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

牡蠣（Concha Ostreae），又稱生蠔、海蠣子等，屬于牡蠣科（Ostreidae 真牡蠣）或燕蛤科（Aviculidae 珍珠牡蠣）雙殼類軟體動物，分布于溫帶和熱帶各大洋沿岸水域，我國沿海地區(qū)均有生長，目前已發(fā)現(xiàn)牡蠣有100多種，我國沿海所產(chǎn)牡蠣約20多種，作為主要的養(yǎng)殖種類有近江牡蠣、褶皺牡蠣、長牡蠣、大連灣牡蠣和密鱗牡蠣等（高蒙蒙等，2014；葉盛權(quán)等，2009）。

《本草綱目》記載，牡蠣肉多食之，能細(xì)活皮膚，補(bǔ)腎壯陽，并能治

虛損，解丹毒。中醫(yī)認(rèn)為牡蠣肉具有很好的滋陰和補(bǔ)血功效，適用于虛勞、虛損和陰虛、血虧和氣血不足的病患。

牡蠣肉質(zhì)乳白、細(xì)嫩、營養(yǎng)豐富，富含蛋白質(zhì)、多糖、維生素和微

量元素等，是人體生長和代謝活動所必需的，被認(rèn)為是人類最接近理想的食品，在古代就已被認(rèn)為“海族中之最貴者”。（葉盛權(quán)等，2009）

現(xiàn)代科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，每100g牡蠣肉含能量57千卡、蛋白質(zhì)10.

脂肪1.5g、鉀375mg、鈉270mg、鈣35mg、鎂10mg、鐵5.5mg、銅11.5mg、磷100mg，以及維生素A、B₁、B₂和其他微生物，其含碘量比牛奶和蛋白高出200倍，其鋅含量為其他食物之冠，還有較多的牛磺酸。牡蠣干品含蛋白質(zhì)50%左右，含多糖20%以上，最高可達(dá)40%。（葉盛權(quán)等，2009；高蒙蒙等，2014）

葉盛權(quán)等（2009）研究牡蠣蛋白質(zhì)和水分含量分別為9.46%和81.42%,酶解后蛋白質(zhì)和水分含量分別為7.36%和83.18%，酶解液濃縮后，蛋白質(zhì)含量高達(dá)52.55%，活性炭脫腥效果最優(yōu)，用量為0.5%，在pH7.0,30℃條件下吸附0.5h，酶解液基本無腥味。

郭玉華等（2008）研究，菠蘿蛋白酶比較適合牡蠣蛋白質(zhì)酶解，條件為pH6.0，溫度55℃，料液比為1:3，加酶量為800u/g，酶解時間4h，在此條件下酶解產(chǎn)物水解度為29.86%，蛋白回收率為67.5%，加熱處理、超聲波和微波處理均不利于牡蠣蛋白的水解。

田振華等（2013）用正交試驗(yàn)提取牡蠣多糖的方法，對多糖提取溫

度、pH值、時間、次數(shù)、料液比進(jìn)行了研究，得出提取牡蠣多糖的

最佳條件為pH8.0，溫度為65℃，時間4h，次數(shù)為3次，料液比為1:15（g/ml）。

黃傳貴等（2009）研究采用醇沉法分離牡蠣多糖，凝膠層析法純

化牡蠣多糖，牡蠣粗提物的多糖含量為36.7%，醇沉法多糖得率為33%，回收率為78%。

張艷軍等（2012）根據(jù)Lq(3⁴)正交實(shí)驗(yàn)對牡蠣多糖提取條件進(jìn)行

了優(yōu)化，確定水提多糖的參數(shù)為pH6.0、提取時間5h、提取次數(shù)為3次、水溶溫度為75℃，該條件下多糖得率為2.56%。

高蒙蒙等（2014）將牡蠣鮮肉制成丙酮粉，依次室溫水、60℃熱

水和稀堿提取牡蠣多糖，對其總糖含量、蛋白質(zhì)含量和單糖組成進(jìn)行分析。結(jié)果溫水提取多糖收率最高達(dá)16.1%，而堿液提取蛋白質(zhì)收率最高達(dá)47.7%。從牡蠣肉中提取得到了3種牡蠣粗多糖，單糖組成都只有葡萄糖。

王俊等（2006）用改進(jìn)工藝分離、純化東海近江牡蠣得牡蠣粗多

糖，并經(jīng)動物實(shí)驗(yàn)證實(shí)牡蠣多糖能增強(qiáng)小鼠細(xì)胞免疫，體液免疫功能，并有一定的抗腫瘤和抗氧化作用。

付猛等（2004）研究了雙酶水解牡蠣蛋白的工藝條件，分析了酶用

量、pH、溫度、雙酶比例、反映時間等因素對牡蠣蛋白水解的影響，通過正交試驗(yàn)，確定最佳水解條件為：溫度45℃，pH7.5，酶用量5000u/g，雙酶活力比（F:D）3:1，時間2h，底物濃度為3%，在此條件下，水解度達(dá)28.68%，酶溶肽得率達(dá)79.89%。

對上述研究進(jìn)行仔細(xì)分析對比后發(fā)現(xiàn)有如下不足

（1）只對牡蠣中一種活性成分蛋白質(zhì)或多糖進(jìn)行研究，而另一種成

分就被廢棄而浪費(fèi)，使牡蠣資源沒有得到充分利用；

（2）牡蠣中的蛋白質(zhì)和多糖通常以糖肽鍵結(jié)合在一起。只是將牡蠣

勻漿后溫水提取多糖，將影響多糖收率，而且也影響多糖的提取純度；

（3）對牡蠣蛋白酶解用酶沒有系統(tǒng)篩選，因此上述文獻(xiàn)中所用蛋白酶不是牡蠣蛋白酶解最佳用酶，因此會影響牡蠣蛋白的酶解收率。