[發明專利]一種藥食真菌菌絲多糖多肽免疫增強劑的制備方法

有效

• 申請號: 201710445560.1
• 申請日: 2017-06-13
• 公開（公告）號: CN107541533B
• 公開（公告）日: 2021-03-19
• 發明（設計）人: 劉瑩瑩;肖毅;肖兵南;蔣小文
• 申請（專利權）人: 湖南民康生物技術研究所
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C12P21/00;C07K1/14;C07K1/30;C07K1/34;C08B37/00;A61K36/07;A61K39/39;A61P37/04
• 代理公司: 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113
• 代理人: 盧宏;周棟

一種藥食真菌菌絲多糖多肽免疫增強劑的制備方法，該方法包括菌絲多糖多肽的物理方法與酶解相結合的高效提取、乙醇沉淀分離、左旋咪唑和高濃度乙醇分別沉淀純化、復合免疫增強注射劑的配伍制劑等步驟。可與疫苗混合或配合注射劑提高動物免疫，生產效率高，相對生產成本低。本發明開發的松乳菇菌絲多糖基于其組成單糖較簡單，可以進一步分解制備稀有功能性單糖，工藝簡單。

技術領域

本發明涉及一種藥食真菌菌絲多糖多肽免疫增強劑的制備方法。

背景技術

食藥真菌功能物質：食藥真菌中富含蛋白質、氨基酸、脂肪、維生素及微量元素等營養物質外,還含有大量多糖、多肽、核苷、萜類等活性物質，其中分離和純化產物,表現出很強的抗腫瘤、抗氧化、免疫調節、抗病毒、抗細菌和抗其它寄生蟲功能,還有治療糖尿病、心血管病和高膽固醇癥的作用，具有防病、治病和調節人體生理機能的功效。近年來國內外學者們對食用菌中的活性物質的研究十分火爆，尤其對食用菌中的生物活性多糖、活性蛋白多肽的研究越來越多，食用菌作為保健食品進入了人民大眾的生活中。隨著大型真菌發酵工藝的成熟，對藥食真菌活性物質的提取從子實體轉向發酵菌絲體。

多糖：多糖又稱聚多糖(polysaccharidc),由單糖聚合成，聚合度大于10的極性大分子，分子量為數萬至數百萬，是構成生命活動的4大基本物質之一，是自然界含量最豐富的生物聚合物，幾乎存在于所有生物體中。多糖與生命的多種生理功能密切相關，不僅為生物提供骨架結構和能量來源，還參與細胞各種生理過程的調節。許多功能性多糖具有降血糖、降血脂、抗氧化、抗病毒、抗癌和免疫調節等功能。真菌多糖是重要的一類，系從真菌子實體、菌絲體、發酵液中分離出來的，包括酵母多糖、香菇多糖、裂殖多糖、靈芝多糖、黑木耳多糖、灰樹花多糖等。

多糖與蛋白質一樣結構分子復雜，蛋白質由20種氨基酸組成，而多糖由上百種單糖(單糖按碳原子數分為3、4、5、6碳糖，按官能團分為酮糖和醛糖，酮糖和醛糖基于手性碳原子可形成2ⁿ個對映體…等)，通過不同的糖苷鍵(α—1，4；β—1，3；β—1，4；β—1，6；α—1，6等糖苷鍵)構建成含10個以上單糖(自然界多糖多為80—100個單糖組成)的結構物；其結構有直鏈型和支鏈型，進而形成不同的立體結構。因此，多糖種類繁多，性質千差萬別。多糖的理化性質分析包括分子量測定和結構分析，前者因多糖分子量不均一性而比較困難，通常所測得的分子量一般只能是一種統計平均值；后者有化學方法(酸水解法、甲基化反應、堿降解法)和物理分析法(紅外光譜、核磁共振、質譜、氣相色譜、紫外光譜等)。還有，比旋光測定常用作α或β苷鍵的判斷，X射線衍射分析法、激光喇曼光譜法、熱譜法等用來分析多糖鏈的結構。近年來，對天然多糖的分子組分及結構有不少研究，但多糖結構的研究起步比蛋白質研究晚，且測定方法更復雜，難度更大。因此，至今許多重要多糖的組成結構不清，或不同的測定存在差異，如貴紅2003年報道的松乳菇子實體多糖為葡萄糖、果糖、半乳糖和甘露糖等單糖^[12]，但丁祥等2012年的專利報道是甘露糖與木糖以3:1組成^[24]，二者差異很大。