[發(fā)明專利]一種胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶突變體及其基因和應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710441642.9 | 申請日： | 2017-06-13 |
| 公開（公告）號： | CN107502601B | 公開（公告）日： | 2020-04-21 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 張會圖;路福平;張瑩;孫同韋 | 申請（專利權(quán)）人： | 天津科技大學(xué) |
| 主分類號： | C12N9/20 | 分類號： | C12N9/20;C12N15/55;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 天津盛理知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 12209 | 代理人： | 趙瑤瑤 |
| 地址： | 300222 天津市河*** | 國省代碼： | 天津;12 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 胰蛋白酶 抗性 改良 脂肪酶 突變體 及其 基因 應(yīng)用 | ||
1.一種定點突變的脂肪酶突變體，其特征在于，將氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的脂肪酶的第36位的賴氨酸突變?yōu)楦拾彼崆业?9位的賴氨酸突變?yōu)樘K氨酸。
2.一種定點突變的脂肪酶突變體，其特征在于，將氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的脂肪酶的第63位精氨酸突變?yōu)楦拾彼帷?/p>
3.一種定點突變的脂肪酶突變體，其特征在于，將氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的脂肪酶的第36位的賴氨酸突變?yōu)楦拾彼幔?9位的賴氨酸突變?yōu)樘K氨酸，且第63位精氨酸突變?yōu)楦拾彼帷?/p>
4.一種定點突變的脂肪酶基因，其特征在于，其編碼權(quán)利要求1所述的定點突變的脂肪酶突變體，基因核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；
或權(quán)利要求2所述的定點突變的脂肪酶突變體，基因核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；
或權(quán)利要求3所述的定點突變脂肪酶突變體，基因核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。
5.包含權(quán)利要求4所述脂肪酶突變體基因的重組載體及重組菌株。
6.包含權(quán)利要求4所述脂肪酶突變體基因的重組菌株。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的重組菌株，其特征在于，所述重組菌株為畢赤酵母。
8.一種制備胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶lipY2-m的方法，其特征在于，包括以下步驟
⑴用權(quán)利要求5的重組載體轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞，得重組菌株；
⑵培養(yǎng)重組菌株，誘導(dǎo)重組定點突變的脂肪酶lipY2-m的表達(dá)；
⑶回收并純化所表達(dá)的定點突變的脂肪酶lipY2-m。
9.權(quán)利要求1或2或3所述的定點突變的脂肪酶突變體在制備治療胰腺炎的藥物方面中的應(yīng)用。
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