[發(fā)明專利]一種適用焉耆馬對側(cè)步步態(tài)控制的檢測試劑盒及應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710438714.4 | 申請日: | 2017-06-12 |
| 公開(公告)號: | CN107151701B | 公開(公告)日: | 2021-05-11 |
| 發(fā)明(設計)人: | 齊·阿拉達爾;李海;艾爾鄧巴依爾;才巴特;鄧海峰 | 申請(專利權(quán))人: | 中國科學院新疆生態(tài)與地理研究所;新疆農(nóng)業(yè)大學;昭蘇縣畜牧獸醫(yī)站 |
| 主分類號: | C12Q1/6888 | 分類號: | C12Q1/6888;C12Q1/6858 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 830011 新疆維吾*** | 國省代碼: | 新疆;65 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 適用 焉耆馬 步態(tài) 控制 檢測 試劑盒 應用 | ||
1.一種適用焉耆馬對側(cè)步步態(tài)控制的檢測試劑盒,其特征在于,所述的試劑盒通過以下共建體系建成獲得:
(1)設計引物對:根據(jù)焉耆馬DMRT3基因序列設計特異性引物;正向引物:5'-AGCGACAAAGACACCGACCAG-3';反向引物:5'-TTGCCAAAGTATTCCTCAGCATCA-3';
(2)PCR反應試劑:10×PCR緩沖液2uL、2.5mM dNTP 2uL、10uM正向引物0.5uL、10uM反向引物0.5uL、taq酶0.2uL、樣本基因組DNA 1uL、ddH2O 18uL;
(3)酶切所需試劑:Dde I核酸內(nèi)切酶1uL及其緩沖液2uL。
2.一種如權(quán)利要求1所述的適用焉耆馬對側(cè)步步態(tài)控制的檢測試劑盒的應用,其特征在于,包括以下步驟:
(1)提取待檢測樣本基因組DNA;
(2)利用正向引物、反向引物進行PCR擴增;PCR擴增的反應體系為:10×PCR緩沖液2uL、2.5mM dNTP 2uL、10uM正向引物0.5uL、10uM反向引物0.5uL、taq酶0.2uL、樣本基因組DNA1uL和ddH2O 13.8uL,總計20μL;擴增程序為95℃預變性3min;95℃變性30s,58℃退火30s,72℃延伸45s,40個循環(huán);最后72℃延伸10min;
(3)擴增PCR反應產(chǎn)物10uL與Dde I核酸內(nèi)切酶1uL、酶切緩沖液2uL和ddH2O 18uL,37℃水浴2h,65℃水浴30min,酶切后電泳分析出現(xiàn)雙條帶判定為對側(cè)步步態(tài)的馬;出現(xiàn)單一條帶或三條帶判定為非對側(cè)步步態(tài)的馬。
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