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[發(fā)明專利]一種適用焉耆馬對側(cè)步步態(tài)控制的檢測試劑盒及應用有效

專利信息
申請?zhí)枺?/td> 201710438714.4 申請日: 2017-06-12
公開(公告)號: CN107151701B 公開(公告)日: 2021-05-11
發(fā)明(設計)人: 齊·阿拉達爾;李海;艾爾鄧巴依爾;才巴特;鄧海峰 申請(專利權(quán))人: 中國科學院新疆生態(tài)與地理研究所;新疆農(nóng)業(yè)大學;昭蘇縣畜牧獸醫(yī)站
主分類號: C12Q1/6888 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6858
代理公司: 暫無信息 代理人: 暫無信息
地址: 830011 新疆維吾*** 國省代碼: 新疆;65
權(quán)利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 一種 適用 焉耆馬 步態(tài) 控制 檢測 試劑盒 應用
【權(quán)利要求書】:

1.一種適用焉耆馬對側(cè)步步態(tài)控制的檢測試劑盒,其特征在于,所述的試劑盒通過以下共建體系建成獲得:

(1)設計引物對:根據(jù)焉耆馬DMRT3基因序列設計特異性引物;正向引物:5'-AGCGACAAAGACACCGACCAG-3';反向引物:5'-TTGCCAAAGTATTCCTCAGCATCA-3';

(2)PCR反應試劑:10×PCR緩沖液2uL、2.5mM dNTP 2uL、10uM正向引物0.5uL、10uM反向引物0.5uL、taq酶0.2uL、樣本基因組DNA 1uL、ddH2O 18uL;

(3)酶切所需試劑:Dde I核酸內(nèi)切酶1uL及其緩沖液2uL。

2.一種如權(quán)利要求1所述的適用焉耆馬對側(cè)步步態(tài)控制的檢測試劑盒的應用,其特征在于,包括以下步驟:

(1)提取待檢測樣本基因組DNA;

(2)利用正向引物、反向引物進行PCR擴增;PCR擴增的反應體系為:10×PCR緩沖液2uL、2.5mM dNTP 2uL、10uM正向引物0.5uL、10uM反向引物0.5uL、taq酶0.2uL、樣本基因組DNA1uL和ddH2O 13.8uL,總計20μL;擴增程序為95℃預變性3min;95℃變性30s,58℃退火30s,72℃延伸45s,40個循環(huán);最后72℃延伸10min;

(3)擴增PCR反應產(chǎn)物10uL與Dde I核酸內(nèi)切酶1uL、酶切緩沖液2uL和ddH2O 18uL,37℃水浴2h,65℃水浴30min,酶切后電泳分析出現(xiàn)雙條帶判定為對側(cè)步步態(tài)的馬;出現(xiàn)單一條帶或三條帶判定為非對側(cè)步步態(tài)的馬。

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