[發明專利]胃膜素和胃蛋白酶的聯合提取方法

有效

• 申請號: 201710438060.5
• 申請日: 2017-06-12
• 公開（公告）號: CN107299094B
• 公開（公告）日: 2020-09-29
• 發明（設計）人: 龔征強;葉長蓉
• 申請（專利權）人: 四川菲德力制藥有限公司
• 主分類號: C12N9/64
• 分類號: C12N9/64;C07K14/47;C07K1/14
• 代理公司: 成都正華專利代理事務所(普通合伙) 51229
• 代理人: 李林合

1.一種胃膜素和胃蛋白酶的聯合提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)以料液比為1:1.55～1.65的比例，向豬胃黏膜中加入體積分數為4％～6％的鹽酸溶液，再加入50％～60％豬胃黏膜重量的苯甲酸鈉，40～45℃浸泡1～2h，過濾，收集濾液；

(2)向濾液中加入堿性脂肪酶，于32～35℃，pH值為9.0～9.2的條件下酶解0.5～1.5h，繼續加入中性脂肪酶，于32～35℃，pH值為7.0的條件下酶解0.5～1.5h，再將其濃縮為原濾液體積的1/3～1/2，冷卻至0～5℃；其中，堿性脂肪酶和中性脂肪酶與濾液的重量體積比均為0.02～0.05:1；

(3)調節上述濃縮液pH值為3.0～6.0，再緩慢加入等體積的0～5℃的丙酮，并在添加過程中迅速攪拌，靜置16～20h，過濾，分別收集胃膜素粗品和上清液，向胃膜素粗品中加入0～5℃的95％乙醇，洗滌2～3次，分離胃膜素和洗滌液，于70～80℃真空干燥胃膜素，得胃膜素精品；

(4)將步驟(3)中所述洗滌液與上清液合并，在快速攪拌過程中，緩慢加入1.5～2倍混合液體積的混合鹽溶液，調節溶液pH值為4.0～5.0，靜置20～28h，離心，再用90％乙醇洗滌沉淀物2～3次，得胃蛋白酶；所述混合鹽溶液包括硫酸銨溶液和氯化鈉溶液，兩者體積比為2～3:7～11。

2.根據權利要求1所述的胃膜素和胃蛋白酶的聯合提取方法，其特征在于，步驟(1)中所述料液比為1:1.61。

3.根據權利要求1所述的胃膜素和胃蛋白酶的聯合提取方法，其特征在于，步驟(1)中所述鹽酸體積分數為5.4％。