[發明專利]胃膜素和胃蛋白酶的聯合提取方法

有效

• 申請號: 201710438060.5
• 申請日: 2017-06-12
• 公開（公告）號: CN107299094B
• 公開（公告）日: 2020-09-29
• 發明（設計）人: 龔征強;葉長蓉
• 申請（專利權）人: 四川菲德力制藥有限公司
• 主分類號: C12N9/64
• 分類號: C12N9/64;C07K14/47;C07K1/14
• 代理公司: 成都正華專利代理事務所(普通合伙) 51229
• 代理人: 李林合

本發明公開了一種胃膜素和胃蛋白酶的聯合提取方法。該方法包括以下步驟：（1）向豬胃黏膜中加入鹽酸溶液和苯甲酸鈉溶液，過濾，收集濾液：（2）向濾液中分別加入堿性脂肪酶和中性脂肪酶，酶解，濃縮酶解液；（3）向濃縮液中加入丙酮，過濾，洗滌，得胃膜素以及上清液和洗滌液的合并液；（4）向合并液中加入混合鹽溶液，靜置離心，得胃蛋白酶。本發明方法可有效降低生產成本，減少安全隱患，還可提升胃膜素得率和胃蛋白酶酶活。

技術領域

本發明具體涉及一種胃膜素和胃蛋白酶的聯合提取方法。

背景技術

胃蛋白酶和胃膜素均是自豬胃粘膜中提取而得的兩種不同的物質；其中，胃蛋白酶的功能是將食物中的蛋白質分解為小的肽片段，目前主要作為一種助消化劑，用于治療消化不良、食欲補正及慢性胃炎等癥狀；而胃膜素是豬胃粘黏膜消化提取制得的一種粘蛋白，有抗胃蛋白酶分解和弱抗酸作用，能在胃內形成膜，覆蓋潰瘍面，減少胃酸的刺激，有利于潰瘍面的愈合，還可減少患者的痛苦。

然后，一般提取過程均為單一提取某一種成分，未進行綜合利用，另外，在提取過程中大量使用丙酮進行沉淀分離，由于丙酮具有易揮發、價格高昂、易燃、有毒等特性，使用丙酮進行分離，即提升了生產成本，又帶來了較高的安全隱患。

發明內容

針對現有技術中的上述不足，本發明提供一種胃膜素和胃蛋白酶的聯合提取方法，可有效解決現有工藝生產成本高昂，且安全隱患高的問題。

一種胃膜素和胃蛋白酶的聯合提取方法，包括以下步驟：

（1）以料液比為1:1.55~1.65的比例，向豬胃黏膜中加入體積分數為4%~6%的鹽酸溶液，再加入50%~60%豬胃黏膜重量的苯甲酸鈉，40~45℃浸泡1~2h，過濾，收集濾液；

（2）向濾液中加入堿性脂肪酶，于32~35℃，pH值為9.0~9.2的條件下酶解0.5~1.5h，繼續加入中性脂肪酶，于32~35℃，pH值為7.0的條件下酶解0.5~1.5h，再將其濃縮為原濾液體積的1/3~1/2，冷卻至0~5℃；其中，堿性脂肪酶和中性脂肪酶與濾液的重量體積比均為0.02~0.05:1；

（3）調節上述濃縮液pH值為3.0~6.0，再緩慢加入等體積的0~5℃ 的丙酮，并在添加過程中迅速攪拌，靜置16~20h，過濾，分別收集胃膜素粗品和上清液，向胃膜素粗品中加入0~5℃的95%乙醇，洗滌2~3次，分離胃膜素和洗滌液，于70~80℃真空干燥胃膜素，得胃膜素精品；

（4）將步驟（3）中所述洗滌液與上清液合并，在快速攪拌過程中，緩慢加入1.5~2倍混合液體積的混合鹽溶液，調節溶液pH值為4.0~5.0，靜置20~28h，離心，再用90%乙醇洗滌沉淀物2~3次，得胃蛋白酶。

進一步地，步驟（1）中料液比為1:1.61。

進一步地，步驟（1）中鹽酸體積分數為5.4%。

進一步地，步驟（4）中所述混合鹽溶液包括硫酸銨溶液和氯化鈉溶液，兩者體積比為2~3:7~11。

本發明的有益效果為：

1、所用鹽酸體積為豬胃黏膜重量的1.61倍，在此鹽酸體積條件下，豬胃黏膜中的胃膜素和胃蛋白酶均具有最大得率，有利于減少后續丙酮的加入量，降低了生產成本，便于后續操作。

2、所用鹽酸溶液的體積分數為5.4%，在此條件下，豬胃黏膜中的胃膜素具有最大得率，可達5.64%，而現有方法得率一般為4.5%左右；如若鹽酸濃度過高，胃膜素則會被分解為蛋白質和多糖，加入鹽酸濃度過低，胃膜素的得率將會下降。

3、苯甲酸鈉具有干擾改變細胞膜通透性的作用，可使豬胃黏膜細胞膜對胃膜素和胃蛋白酶通透性增加，提升胃膜素和胃蛋白酶的得率。