[發明專利]X?連鎖淋巴增殖綜合征診斷試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 201710437608.4
• 申請日: 2017-06-12
• 公開（公告）號: CN107037219A
• 公開（公告）日: 2017-08-11
• 發明（設計）人: 王昭;高卓;張嘉;王旖旎;王晶石;吳林;賴雯苑;金志麗;孟碩;宋悅;崔婷婷
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學附屬北京友誼醫院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N15/14
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙)11371
• 代理人: 李丙林

技術領域

本發明涉及醫學診斷技術領域，具體而言，涉及一種X-連鎖淋巴增殖綜合征診斷試劑盒及其應用。

背景技術

SAP(SLAM associated protein)蛋白是小分子的接頭蛋白，有一個SH2域，在介導淋巴細胞的激活分子(SLAM)家族的信號受體中起了重要的信號轉導作用。SAP蛋白作為細胞液內的信號轉接器和調控開關，通過和SLAM相關因子的相互作用來調節機體的免疫細胞對EB病毒的反應。當SH2D1A基因發生突變，并影響遺傳信息的轉錄和SAP蛋白表達時，就會改變SAP蛋白功能，這樣通過SAP蛋白與SLAM家族的因子的作用關系，進一步影響免疫細胞的活化和抗病毒免疫信號的傳遞，使SAP蛋白不能正常的介導T/B細胞間相互作用，所以在EB病毒感染后，B淋巴細胞過度增生，而機體免疫系統卻無法正常控制，最終導致臨床上出現XLP相應的臨床表現。

X-連鎖淋巴組織增殖綜合征(X-linked Lymph Proliferative Disease，XLP)是一種少見的、常常是致死性的原發性免疫缺陷病，可由EB病毒(Epstein–Barr virus，EBV)感染誘發，表現為爆發性傳染性單核細胞增多癥、丙種球蛋白異常血癥和淋巴增殖性疾病以及淋巴瘤。X-連鎖淋巴增殖綜合征包括XLP-1和XLP-2，以X連鎖隱性方式遺傳，多見于男性。本病主要由編碼淋巴信號活化分子相關蛋白(SAP)、X-連鎖凋亡抑制因子(XIAP)和IL-2誘導的T細胞激酶(ITK)基因的突變引起，基因序列分析是確診XLP的依據；SAP、XIAP、ITK蛋白的表達也可以作為篩查XLP的手段。家族史是需要考慮的主要客觀指標，其他診斷標準包括患兒的臨床表現、EB病毒感染后的EBNA抗體檢測等。

XLP-1由位于X染色體上的編碼T細胞、NK，NKT細胞SAP蛋白的SH2D1A基因突變所致。被EBV感染的B細胞(B-EBV)可招募SAP蛋白及傳遞激活信號，從而消除B-EBV；當SH2DIA基因突變導致SAP蛋白量減少或結構改變影響功能時，就會導致淋巴細胞對EBV應答中發生無限制增殖，并且出現NK細胞功能障礙。

目前存在多種SAP蛋白的檢測方法，其中靶細胞的選擇，結果的確證，等問題是技術領域的核心問題，是決定檢測結果是否理想的關鍵。目前尚缺乏統一規范的操作流程。

有鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的目的在于提供一種X-連鎖淋巴增殖綜合征診斷試劑盒以及使用該試劑盒檢測SAP蛋白豐度的檢測方法，所述的檢測方法可解決現有技術檢測速度慢、精度較低、準確性較差、檢測結果容易受到檢測者的主觀因素影響等問題。

為了實現本發明的上述目的，特采用以下技術方案：

一種X-連鎖淋巴增殖綜合征診斷試劑盒，所述試劑盒包括：

抗人CD3、CD56、CD8a、SAP的流式熒光抗體、所述抗人SAP的流式熒光抗體的同型對照熒光抗體、抗人SAP的Western Blot抗體以及所述抗人SAP的Western Blot抗體對應的二抗。

優選的，抗人CD3、CD56、CD8a、SAP的流式熒光抗體分別購自4abio公司、eBioscience公司、eBioscience公司、eBioscience公司，貨號分別為FHF003-100、17-0566-42、45-0088-42、#12-9787-42；

優選的，所述抗人SAP的流式熒光抗體的同型對照熒光抗體購自Abcam，貨號為#ab109120；

優選的，所述抗人SAP的Western Blot抗體購自Abcam，貨號為#ab97051。