[發(fā)明專利]硫酸軟骨素鈉的制備方法

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• 申請日: 2017-06-12
• 公開（公告）號: CN107216407A
• 公開（公告）日: 2017-09-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 龔征強;葉長蓉
• 申請（專利權(quán)）人: 四川菲德力制藥有限公司
• 主分類號: C08B37/08
• 分類號: C08B37/08
• 代理公司: 成都正華專利代理事務所(普通合伙)51229
• 代理人: 李林合

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物制藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種硫酸軟骨素鈉的制備方法。

背景技術(shù)

硫酸軟骨素鈉是從動物組織中提取的一種酸性粘多糖類物質(zhì)，多存在于動物的軟骨、喉骨、鼻骨、牛馬中膈和氣管中，其分子結(jié)構(gòu)為β-D-葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖通過β₁→3糖苷鍵形成的重復二糖單位所組成的多糖鏈。

硫酸軟骨素鈉主要用于治療風濕和類風濕疾病的藥物，還具有抗凝、抗癌、抗血栓、降血脂等作用，可用于治療頭痛、偏頭痛、冠心病、心絞痛等癥狀。

目前硫酸軟骨素鈉采用的是堿鹽消化沉淀法，即軟骨經(jīng)堿化后，酶解、過濾后用酒精直接沉淀，按此方法生產(chǎn)硫酸軟骨素鈉含量和純度均較低。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)中的上述不足，本發(fā)明提供了一種硫酸軟骨素鈉的制備方法，可有效解決現(xiàn)有技術(shù)生產(chǎn)硫酸軟骨素鈉含量和純度均較低的問題。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：

一種硫酸軟骨素鈉的制備方法，包括以下步驟：

(1)提取：將豬軟骨和水按重量比為1:3-5混合，加熱煮沸20-40min，然后加入2-3％豬軟骨重量的氯化鈉，再用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至8-11；

(2)超聲波酶解：向步驟(1)所得物中加入復合酶，混合，在以超聲為介質(zhì)的條件下進行酶解，超聲時間為20-30min，超聲功率為250-300W，單次超聲時間為2-4s，超聲時間與間歇時間比為2-5:1，然后離心，過濾，得濾液；其中，所添加的復合酶占步驟(1)所得物重量的2-5％；

(3)微波提取：向步驟(2)所得濾液中繼續(xù)加入復合酶，混合，然后置于微波提取器中提取，微波功率為250-300W，提取時間為5-10min；其中，所添加的復合酶占步驟(2)所得物重量的1-3％；

(4)酶解：向步驟(3)所得物中加入蛋白酶，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至8-10，置于50-60℃條件下攪拌40-60min，再用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至6-6.5，靜置，過濾，得濾液；其中，所添加的蛋白酶占步驟(3)所得物重量的2-4％；

(5)沉淀：將步驟(4)所得濾液溫度維持在50-60℃，加入95％乙醇，靜置至沉淀量不再增加，過濾，得沉淀物；其中，步驟(4)所得濾液與95％乙醇的體積比為2-3:1；

(6)脫色：將步驟(5)所得沉淀物加入氯化鈉溶液溶解，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至8-10，再將溶液升溫至35-40℃，加雙氧水靜置氧化脫色2-3h，過濾，得濾液；其中，所加氯化鈉溶液的質(zhì)量濃度為2-5％，沉淀物占氯化鈉溶液重量的10-15％，雙氧水占氯化鈉溶液的0.5-0.8％；

(7)沉淀：將步驟(6)所得濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至5.8-6.0，然后加乙醇使沉淀度數(shù)達60-70度，沉淀5-8h，再向沉淀物中加乙醇，使沉淀度數(shù)達80-90度，沉淀5-8h，收集沉淀物；

(8)脫水：向步驟(7)所得沉淀物中加75％乙醇浸泡2次，真空干燥，得硫酸軟骨素鈉成品。

進一步地，步驟(2)中所添加的復合酶占步驟(1)所得物重量的3％。

進一步地，復合酶為蛋白酶、脂肪酶和核酸酶按質(zhì)量比為6-8:0.8-1.2:0.2-0.4混合的混合物。

進一步地，復合酶為蛋白酶、脂肪酶和核酸酶按質(zhì)量比為8:1.0:0.2混合的混合物。

進一步地，蛋白酶、脂肪酶和核酸酶酶活均為3.5萬U/g。

進一步地，步驟(2)中超聲時間為30min，超聲功率為280W，單次超聲時間為3s，超聲時間與間歇時間比為4:1。

進一步地，步驟(3)中微波功率為280W，提取時間為8min。

進一步地，步驟(3)中所添加的復合酶占步驟(2)所得物重量的1.8％。

進一步地，步驟(4)中所添加的蛋白酶占步驟(3)所得物重量的2.5％。

進一步地，步驟(7)中加乙醇使沉淀度數(shù)達65度，沉淀8h，再向沉淀物中加乙醇，使沉淀度數(shù)達80度，沉淀6h。

本發(fā)明提供的一種硫酸軟骨素鈉的制備方法，具有以下有益效果：