[發(fā)明專利]硫酸軟骨素鈉的制備方法

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• 申請日: 2017-06-12
• 公開（公告）號: CN107216407A
• 公開（公告）日: 2017-09-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 龔征強(qiáng);葉長蓉
• 申請（專利權(quán)）人: 四川菲德力制藥有限公司
• 主分類號: C08B37/08
• 分類號: C08B37/08
• 代理公司: 成都正華專利代理事務(wù)所(普通合伙)51229
• 代理人: 李林合

1.一種硫酸軟骨素鈉的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)提取：將軟骨和水按重量比為1:3-5混合，加熱煮沸20-40min，然后加入2-3％軟骨重量的氯化鈉，再用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至8-11；

(2)超聲波酶解：向步驟(1)所得物中加入復(fù)合酶，混合，在以超聲為介質(zhì)的條件下進(jìn)行酶解，超聲時(shí)間為20-30min，超聲功率為250-300W，單次超聲時(shí)間為2-4s，超聲時(shí)間與間歇時(shí)間比為2-5:1，然后離心，過濾，得濾液；其中，所添加的復(fù)合酶占步驟(1)所得物重量的2-5％；

(3)微波提取：向步驟(2)所得濾液中繼續(xù)加入復(fù)合酶，混合，然后置于微波提取器中提取，微波功率為250-300W，提取時(shí)間為5-10min；其中，所添加的復(fù)合酶占步驟(2)所得物重量的1-3％；

(4)酶解：向步驟(3)所得物中加入蛋白酶，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至8-10，置于50-60℃條件下攪拌40-60min，再用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至6-6.5，靜置，過濾，得濾液；其中，所添加的蛋白酶占步驟(3)所得物重量的2-4％；

(5)沉淀：將步驟(4)所得濾液溫度維持在50-60℃，加入95％乙醇，靜置至沉淀量不再增加，過濾，得沉淀物；其中，步驟(4)所得濾液與95％乙醇的體積比為2-3:1；

(6)脫色：將步驟(5)所得沉淀物加入氯化鈉溶液溶解，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至8-10，再將溶液升溫至35-40℃，加雙氧水靜置氧化脫色2-3h，過濾，得濾液；其中，所加氯化鈉溶液的質(zhì)量濃度為2-5％，沉淀物占氯化鈉溶液重量的10-15％，雙氧水占氯化鈉溶液的0.5-0.8％；

(7)沉淀：將步驟(6)所得濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至5.8-6.0，然后加乙醇使沉淀度數(shù)達(dá)60-70度，沉淀5-8h，再向沉淀物中加乙醇，使沉淀度數(shù)達(dá)80-90度，沉淀5-8h，收集沉淀物；

(8)脫水：向步驟(7)所得沉淀物中加75％乙醇浸泡2次，真空干燥，得硫酸軟骨素鈉成品。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的硫酸軟骨素鈉的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所添加的復(fù)合酶占步驟(1)所得物重量的3％。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的硫酸軟骨素鈉的制備方法，其特征在于，復(fù)合酶為蛋白酶、脂肪酶和核酸酶按質(zhì)量比為6-8:0.8-1.2:0.2-0.4混合的混合物。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的硫酸軟骨素鈉的制備方法，其特征在于，復(fù)合酶為蛋白酶、脂肪酶和核酸酶按質(zhì)量比為8:1.0:0.2混合的混合物。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的硫酸軟骨素鈉的制備方法，其特征在于，蛋白酶、脂肪酶和核酸酶酶活均為3.5萬U/g。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的硫酸軟骨素鈉的制備方法，其特征在于，步驟(2)中超聲時(shí)間為30min，超聲功率為280W，單次超聲時(shí)間為3s，超聲時(shí)間與間歇時(shí)間比為4:1。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的硫酸軟骨素鈉的制備方法，其特征在于，步驟(3)中微波功率為280W，提取時(shí)間為8min。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的硫酸軟骨素鈉的制備方法，其特征在于，步驟(3)中所添加的復(fù)合酶占步驟(2)所得物重量的1.8％。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的硫酸軟骨素鈉的制備方法，其特征在于，步驟(4)中所添加的蛋白酶占步驟(3)所得物重量的1.5％。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的硫酸軟骨素鈉的制備方法，其特征在于，步驟(7)中加乙醇使沉淀度數(shù)達(dá)65度，沉淀8h，再向沉淀物中加乙醇，使沉淀度數(shù)達(dá)80度，沉淀6h。