[發明專利]S-2765凝血檢測發光底物的肝素含量的測定方法在審
| 申請號： | 201710433323.3 | 申請日： | 2017-06-09 |
| 公開（公告）號： | CN109030824A | 公開（公告）日： | 2018-12-18 |
| 發明（設計）人： | 周勇 | 申請（專利權）人： | 深圳標實科技有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/68 | 分類號： | G01N33/68 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 518172 廣東省深圳市龍崗區龍城*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 標準曲線 肝素 待測樣品 待檢樣品 發光底物 發色底物 加熱處理 抗凝血酶 凝血檢測 試劑用量 大影響 靈敏度 濃縮物 滅活 省時 稀釋 制作 繪制 檢測 | ||
【權利要求書】：
1.一種S-2765凝血檢測發光底物的肝素含量的測定方法，其特征在于，包括待測樣品的處理、標準曲線的制作與樣品的測定三個部分；其操作步驟為：
A、待測樣品的處理：
用0.03mol/L Tris緩沖液將已知效價的抗凝血酶-Ⅲ濃縮物樣品稀釋至抗凝血酶-Ⅲ濃度為1IU/ml，60～80℃高溫水浴處理30～50min；
B、標準曲線的制作與樣品的測定：
a用Tris緩沖液pH8.4將已知效價的肝素標準品稀釋至0～0.1IU/ml的已知濃度，作為標準溶液；
b取四種或四種以上不同濃度肝素標準溶液及處理后的待測樣品溶液一定體積于微孔板不同孔中；
c每孔加入等體積0.5～2.0IU/ml抗凝血酶-Ⅲ標準溶液，混合均勻，37℃孵育3分鐘；
d每孔加入等體積活化的牛凝血因子Ⅹ溶液即牛FXa溶液，混合均勻，37℃孵育3分鐘；
e每孔加入等體積的S-2765凝血檢測發光底物，即發色底物N-α-芐氧羰基-D-精氨酰-L-甘氨酰-L-精氨酸-P-硝基苯胺的鹽酸鹽溶液，混合均勻，37℃孵育3分鐘；
f每孔加入適量乙酸，混合均勻終止反應；
g將微孔板直接在酶標儀上于波長405nm處讀取吸光值；
h根據肝素標準溶液濃度與測得的相應吸光值繪制標準曲線；
i以待測溶液反應產物吸光值根據標準曲線計算每國際單位人抗凝血酶-Ⅲ溶液中肝素的含量。
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