[發明專利]以葉片為外植體的玉露離體快繁方法

有效

• 申請號: 201710429395.0
• 申請日: 2017-06-08
• 公開（公告）號: CN107155890B
• 公開（公告）日: 2021-02-09
• 發明（設計）人: 崔金騰;袁成飛;張克中
• 申請（專利權）人: 北京農學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京國坤專利代理事務所(普通合伙) 11491
• 代理人: 姜彥

1.以葉片為外植體的玉露離體快繁方法，其特征在于包括下列步驟：

1)外植體接種及愈傷組織誘導：取玉露植株的幼嫩葉片，放入無菌超凈臺中，用75％

體積/體積酒精浸泡30～60s，用無菌水沖洗2～3 次后，迅速倒入1.5～3％質量/體

積次氯酸鈉溶液中浸泡8～10min，傾去次氯酸鈉溶液，再用無菌水沖洗4～5 次，將處理好的玉露葉片，橫切成1cm 左右小段；接種在MS 固體培養基上，待長出黃綠色粒狀愈傷時即可誘導分化；

2)叢生芽的誘導：將愈傷轉接到誘導分化培養基；光照強度為1500～2000Lux，光

照時間每天12～14 小時，培養溫度在24℃～28℃，40～50 天繼代一次，該愈傷分化

能力可持續一年以上；從一塊愈傷經過反復繼代可分化出800 株左右的再生苗；

3)壯苗培養：再生苗轉到1/2MS+20％天然椰汁體積/體積，pH 值為5.6～6.0 的壯苗培養基上，光照強度1500～2000Lux，光照時間每天12～14 小時，培養溫度在24℃～28℃；

4)再生植株移栽；所述外植體接種及愈傷組織誘導中MS 固體培養基添加6-BA0.5mg/L， NAA0.1mg/L，KT1mg/L，蔗糖3.0％質量/體積，瓊脂6.0％質量/體積，pH 值為5.6～ 6.0；所述叢生芽的誘導中誘導分化培養基為：MS+KT0.5mg/L+6-BA0.1～ 0.2mg/L+NAA0～0.1mg/L+IAA0.1～0.5mg/L+20.0％天然椰汁體積/體積，瓊脂 6.0％質量/體積，pH 值為5.6～6.0 的培養基。

2.如權利要求1 所述的離體快繁方法，其特征在于：所述叢生芽的誘導中光照強度為1500～ 2000Lux，光照時間每天12～14 小時，培養溫度在24℃～28℃，50 天繼代一次。

3.如權利要求1 所述的離體快繁方法，其特征在于：4)再生植株移栽：壯苗植株

長到3～4 厘米后，將壯苗植株的組培瓶拿到溫室中打開，使壯苗植株適應溫室環境5～7 天后，將壯苗植株從組培瓶中取出，將培養基清洗干凈，移栽至100％蛭石或是赤玉土栽培基質中，栽培基質需要經過121℃滅菌30～60 分鐘；7～15 天澆一次透水便可成活。