[發明專利]一種三七黃酮的分離提取方法

有效

• 申請號: 201710427184.3
• 申請日: 2017-06-08
• 公開（公告）號: CN107213180B
• 公開（公告）日: 2020-08-14
• 發明（設計）人: 張文生;曾立品;羅金明;辛文鋒;蔡群虎;劉石磊;胡會澤;楊雪;王芬
• 申請（專利權）人: 云南三七科技有限公司
• 主分類號: A61K36/258
• 分類號: A61K36/258
• 代理公司: 北京精金石知識產權代理有限公司 11470
• 代理人: 張黎

本發明公開了一種三七黃酮的分離提取方法，該方法以三七莖葉為原料，采用乙醇溶液提取后，利用不同物質在丙酮水溶液的溶解性分離去除三七皂苷類化合物，然后用氫鍵大孔樹脂進行吸附解析濃縮，濃縮液經聚酰胺柱層析將三七黃酮和三七黃酮甙分離，獲得高純度的三七黃酮；本發明方法針對性強，分離效果好，獲得的黃酮產物純度大于92%，且方法簡單易操作，適于產業化生產和市場推廣應用。

技術領域

本發明涉及一種三七黃酮的分離提取方法。

背景技術

黃酮類化合物是自然界分布較廣的一類化合物，三七全植株中，三七葉中總黃酮含量較高，含量2%左右，根莖中黃酮含量0.5%，三七莖葉中總黃酮含量高于三七根莖中總黃酮含量。三七莖葉是采挖三七后被大量拋棄的可利用資源，根據初步調查三七莖葉每年可利用資源3000t-4000t，目前僅利用了10%不到；因此三七莖葉中黃酮類物質具有開發價值。

三七黃酮具有止咳平喘祛痰、活血化瘀、保護心肌損傷、擴張血管、抗高血壓，改善微循環、清除氧自由基等作用。

三七黃酮主含黃酮和黃酮甙類，主要為山奈酚、槲皮素類及其甙類。

三七黃酮提取工藝和專利報道較少，在粗提環節中大多采用水提法，水提取法能得到大量黃酮甙類化合物，水溶性較差的黃酮類化合物則難以提取完全，具有局限性。在初純化工藝過程中通常使用AB-8、NK大孔吸附樹脂等，制備所得黃酮含量較低，針對性較差，因三七皂苷和三七黃酮極性相似，洗脫條件基本一樣，現有技術很難將三七黃酮和三七皂苷分離開，針對現有方法提取三七黃酮提取分離率低、純度低等問題。

發明內容

本發明提供了一種簡單、分離效果好、提取率高的三七莖葉黃酮的分離提取方法，本發明方法具體內容如下：

（1）將三七或三七莖葉粉碎后置于提取罐中，加入生藥質量8-10倍的體積濃度70%-80%的乙醇溶液，同時加入氨水調節混合物pH為8-10，加熱回流提取2次以上，合并每次提取液濃縮到清膏加入稀鹽酸調節pH值至中性，繼續濃縮干燥得棕黃色粉末；

（2）將步驟（1）干燥物粉碎后，加入其質量5-7倍體積濃度70%-90%的丙酮水溶液，室溫密閉攪拌提取2-4小時，過濾后，濾渣再加入2體積濃度70%-90%的丙酮水溶液提取一次，丟棄濾渣，合并2次丙酮提取液；

（3）減壓回收濾液中丙酮得流浸膏，向流浸膏中加入乙醇溶液，攪拌溶解流浸膏使得溶液中乙醇量達到體積濃度25-30%，過濾去除不溶物得澄清三七黃酮粗提液；

（4）將步驟（3）三七黃酮粗提液經過氫鍵大孔樹脂進行吸附，吸附后純凈水沖洗到流出液為無色，然后用體積濃度70%-80%的乙醇溶液解析，解析流速為1-2柱體積/h，收集流出的解析液，濃縮得濃縮液；

（5）將步驟（4）濃縮液進行聚酰胺柱層析，上樣完后純凈水沖洗到洗出液為無色，然后用體積濃度35-45%的乙醇溶液解析聚酰胺柱，解析流速為0.5柱體積/h，收集解析液；最后用體積濃度70%-80%的乙醇溶液解析三七黃酮，解析流速為1-2柱體積/h；

（6）將步驟（5）體積濃度35-45%的乙醇溶液解析液減壓濃縮干燥得三七黃酮甙，該粉末水溶性較好，以槲皮素為對照，UV法進行含量測定，黃酮甙含量大于85%；將體積濃度70%-80%乙醇溶液解析液減壓濃縮干燥得三七黃酮；該粉末微溶于水，溶于乙醇，以槲皮素為對照，UV法進行含量測定，黃酮含量大于92%。

所述步驟（4）中氫鍵大孔樹脂型號為HPD417或ADS-17，用量為生藥質量的0.3-0.5倍，上柱流速為1.5-2柱體積/h。

所述步驟（5）中上樣流速為1-2柱體積/h。

所述聚酰胺樹脂用量為生藥質量的0.2-0.4倍。