[發(fā)明專利]一種發(fā)酵制備雞血液體肥料的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710427140.0
• 申請(qǐng)日: 2017-06-08
• 公開（公告）號(hào): CN107099480A
• 公開（公告）日: 2017-08-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 岳喜慶;梁肖娜;楊梅;楊寧;烏日娜;李春強(qiáng)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12N1/14;C05F15/00;C05F1/00;C05F11/08;C12R1/07;C12R1/80;C12R1/66;C12R1/01
• 代理公司: 沈陽科威專利代理有限責(zé)任公司21101
• 代理人: 張述學(xué)

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種液體生物肥料的制備方法，特別是一種發(fā)酵制備雞血液體肥料的方法。

背景技術(shù)

我國(guó)雞血資源豐富，據(jù)統(tǒng)計(jì)僅有20-30%的雞血資源能夠被利用，其余大部分作為廢料被倒掉，但是僅在被利用的雞血資源中又主要應(yīng)用于食品、飼料、藥品等方面，極少應(yīng)用于肥料的開發(fā)與研究。據(jù)試驗(yàn)研究雞血的蛋白質(zhì)含量高達(dá)16-20%，并含有8種氨基酸和有多種酶、礦物質(zhì)、維生素等多種生物活性物質(zhì)。

液體肥料是含有一種或一種以上農(nóng)作物需要的營(yíng)養(yǎng)元素的液體產(chǎn)品。這些營(yíng)養(yǎng)元素作為溶質(zhì)溶解在水中成為溶液或借助于懸浮劑的作用懸浮于水中成為懸浮液。液體肥料大體分為液體氮肥和液體復(fù)合肥兩大類。液體肥料的優(yōu)勢(shì)在于可以根據(jù)實(shí)際的需求精確設(shè)計(jì)肥料的配方，有效的控制各種營(yíng)養(yǎng)元素（包括微量元素）的含量，其特點(diǎn)在于生產(chǎn)過程中無煙塵、無毒害，不會(huì)對(duì)環(huán)境和人體健康造成危害。其施用方便，適用于各種作物，尤其是水果、蔬菜、花卉等植物，對(duì)肥料的利用率明顯提高，對(duì)植物生長(zhǎng)具有較好的調(diào)節(jié)效果，更重要的是能增加植物的產(chǎn)量，提高產(chǎn)品的品質(zhì)，被人們稱為“綠色肥料”。

我國(guó)是農(nóng)業(yè)大國(guó)，因此肥料在我國(guó)的使用量較大，我國(guó)在肥料的研究和利用方面較為落后，所以導(dǎo)致了大量的使用化學(xué)肥料使得我國(guó)大面積的土壤結(jié)構(gòu)發(fā)生惡劣的變化，使得土壤的結(jié)構(gòu)破壞較為嚴(yán)重，土壤自身所含有的微生物種類和數(shù)量的急劇減少，有機(jī)質(zhì)含量降低，由土壤引發(fā)的農(nóng)作物病害顯著增加；同時(shí)在肥料的研發(fā)方面跟不上農(nóng)業(yè)的發(fā)展，導(dǎo)致肥料的種類無法滿足現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技的需求。我國(guó)的肥料種類較為單一主要以固體肥料為主，而固體肥料只可以作為農(nóng)作物的基肥使用而無法作為追肥施用；固體肥料無法滿足現(xiàn)代農(nóng)業(yè)技術(shù)的需求，如噴灌、滴灌等現(xiàn)代科技技術(shù)的實(shí)施；固體肥料無法根據(jù)農(nóng)作物的需求而添加有益微生物適應(yīng)土壤及作物的需求等。

傳統(tǒng)的液體肥料生產(chǎn)方法包括化學(xué)水解法、酶解法、生物發(fā)酵法等，但是化學(xué)水解的最大的弊端在于水解的過程中使用的強(qiáng)酸、強(qiáng)堿會(huì)極大的破壞血液中的生物活性物質(zhì)，而生物發(fā)酵法的最大的優(yōu)勢(shì)在于利用微生物將血液的大分子物質(zhì)降解為小分子的物質(zhì)和水溶性物質(zhì)，而且由于在生物發(fā)酵的過程中沒有加入強(qiáng)酸、強(qiáng)堿，可以最大限度的保留血液中的有益物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，這使之可以最大限度的被植物所利用吸收。與此同時(shí)生物發(fā)酵法具有操作簡(jiǎn)單方便實(shí)施，成本低等多方面的優(yōu)勢(shì)，所以極易被推廣。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種發(fā)酵制備雞血液體肥料的生產(chǎn)方法，解決肥料生產(chǎn)過程中的兩大難題，一是將血液中大分子物質(zhì)被分解成小分子物質(zhì)并且可以直接被植物利用和吸收；二是將從血液本身提取出來的有益微生物添加到物質(zhì)本身，使微生物依然保持活性。

本發(fā)明采用微生物自然發(fā)酵法，將雞血在自然條件下自然發(fā)酵，并且將在發(fā)酵過程中的優(yōu)勢(shì)菌株進(jìn)行提取，再將上述的優(yōu)勢(shì)菌株加入到新鮮血液中，采用多種微生物共同發(fā)酵的方式，將血液中大分子物質(zhì)降解成小分子物質(zhì)如小分子的多糖、單糖、含氮化合物等。與此同時(shí)在自然發(fā)酵過程中產(chǎn)生的大量有益的微生物和多種代謝產(chǎn)物可以提高液體肥料的肥力，并且可以降低液體肥料的生產(chǎn)成本。

本發(fā)明提供的一種發(fā)酵制備雞血液體肥料的方法，包括以下步驟：

（1）雞血發(fā)酵前處理：將新鮮雞血放置在已滅菌好的盛放器皿內(nèi)，加蓋保鮮膜，放置在無菌室內(nèi)，在室溫下自然發(fā)酵30天；

（2）菌種的培養(yǎng)與分離：將發(fā)酵的樣品充分?jǐn)嚢杌靹蚝螅捎?0倍梯度稀釋法將樣品分別涂置細(xì)菌平板培養(yǎng)基、霉菌平板培養(yǎng)基上，將細(xì)菌組和霉菌組分別編號(hào)為A、B，其中細(xì)菌在37℃下培養(yǎng)24h、霉菌在28℃下培養(yǎng)3-4d；

（3）菌種純化：將上述（2）中培養(yǎng)的優(yōu)勢(shì)菌種分別純化分離，純化三代置于4℃冰箱中保存?zhèn)溆茫?/p>

（4）優(yōu)勢(shì)菌種篩選：將上述（3）中得到的優(yōu)勢(shì)菌種經(jīng)過菌株解磷、解鉀、固氮試驗(yàn)、透明圈試驗(yàn)、蛋白質(zhì)含量測(cè)定、可溶性蛋白質(zhì)含量、氨基酸態(tài)氮含量的相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定篩選，最終得到細(xì)菌A₇，A₈，霉菌B₁、 B₄四種菌株為優(yōu)勢(shì)菌株；

（5）優(yōu)勢(shì)菌株鑒定：菌株的初步鑒定通過生理生化試驗(yàn)對(duì)照《伯杰細(xì)菌鑒定手冊(cè)》和《真菌鑒定手冊(cè)》，細(xì)菌和霉菌分別采用16SrDNA擴(kuò)增和ITS擴(kuò)增、測(cè)序，得出細(xì)菌A₇ 為蘇云金芽孢桿菌菌株，A₈為希瓦氏菌株；霉菌B₁為青霉菌屬，B₄為塔賓曲霉。