[發明專利]一種金花茶組培繁育方法在審

申請號：	201710426483.5	申請日：	2017-06-08
公開（公告）號：	CN107125136A	公開（公告）日：	2017-09-05
發明（設計）人：	胡賢根	申請（專利權）人：	合肥市風達農業有限責任公司
主分類號：	A01H4/00	分類號：	A01H4/00
代理公司：	合肥道正企智知識產權代理有限公司34130	代理人：	閆艷艷
地址：	230001 安徽省合肥市肥西***	國省代碼：	安徽;34
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種金花茶組培繁育方法
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【權利要求書】：

1.一種金花茶組培繁育方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)外植體的選擇及消毒：選取健康無病的金花茶種子作為外植體，先將種子經流水沖洗2-4min后，在超凈工作臺上用體積百分數為75％的乙醇溶液表面滅菌1-3min，無菌水沖洗3次，質量百分數為0.1％的HgCl₂溶液滅菌4-6min，無菌水沖洗4次；

(2)金花茶提取液的制備：取適量新鮮嫩綠的金花茶葉片加入到開放的提取罐中，加入水加熱到煮沸狀態煎煮40-60min，葉片與水的料液體積比為1:2-4，之后倒出提取液至液體存儲罐中；再向提取罐中加入水加熱到煮沸狀態煎煮1-2h，且葉片與水的料液體積比為1:3-5，倒出提取液至所述液體存儲罐中，最后濃縮液體存儲罐中的提取液至原體積的1/5-1/3，得金花茶提取液；

(3)初代誘導培養：把步驟(1)經消毒的種子，接種到初代誘導培養基上，在無菌條件下，培養8-12天，直至所述種子長出頂芽；

初代誘導培養基為1/2MS基本培養基+金花茶提取液0.8～1.2g/L+6-BA 0.4～0.8mg/L+NAA 0.2～0.6mg/L+蔗糖20～30g/L+營養液4.0～8.0g/L；

(4)繼代增殖培養：將所述頂芽接種到繼代增殖培養基上培養16-20天，誘導頂芽增殖，得叢生芽；

增殖培養基為1/2B5基本培養基+金花茶提取液0.8～1.2g/L+6-BA 0.4～0.6mg/L+NAA 0.3～0.5mg/L+蔗糖20～30g/L+瓊脂4.0～6.0g/L；

(5)生根培養：待所述叢生芽的單芽長至3.0～5.0cm時，將金花茶組培苗接種到生根培養基中進行誘導生根培養22～26天；

生根培養基為DCR培養基+金花茶提取液1.0～1.6g/L+IBA 0.6～0.8mg/L+NAA 0.4～0.6mg/L+蔗糖15～25g/L+瓊脂6.0～8.0g/L；

(6)試管苗的馴化和移栽：將金花茶生根試管苗從培養室移至塑料大棚放置4～6天后，去瓶蓋煉苗2～4天，取出金花茶幼苗，將其根部用0.1％多菌靈處理1～2min后，移栽至穴盤中的栽培基質內，覆膜保濕3～5天，其間上午及下午各通風透氣一次，每次20～30min，遮蔭65-75％，揭膜后噴施600-800倍液的甲基托布津，且按照10g/m²的用量進行噴施，此后進行正常的栽培管理，即可。

2.根據權利要求1所述的一種金花茶組培繁育方法，其特征在于，所述營養液包括以下組份及其對應的濃度：

硫酸銨0.02～0.04g/L、二水氯化鈣0.01～0.03g/L、七水硫酸鎂0.01～0.03g/L、無水磷酸二氫鉀0.04～0.06g/L、硫酸鋅0.01～0.03g/L和碘化鉀0.02～0.04g/L。

3.根據權利要求1所述的一種金花茶組培繁育方法，其特征在于，所述初代誘導培養、繼代增殖培養以及生根培養的培養條件：環境溫度24±2℃，光照時間12～16h/d，光照強度為2000～3000lx。

4.根據權利要求1所述的一種金花茶組培繁育方法，其特征在于，所述DCR培養基的組成及其含量為：NH₄NO₃ 0.03-0.05g/L、KH₂PO₄ 0.06-0.08g/L、CaCl₂·2H₂O 0.02-0.04g/L、Ca(NO₃)₂·4H₂O 0.06-0.1g/L、MgSO₄·7H₂O 0.06-0.08g/L、FeSO₄·7H₂O 0.04-0.06g/L、ZnSO₄·7H₂O 0.05-0.07g/L、KI 0.04-0.08g/L、甘露醇0.3-0.5g/L、VB1 0.01-0.03g/L和VC 0.02-0.04g/L。