[發明專利]美洲大蠊特異性COI引物、含有其的試劑盒及應用

有效

• 申請號: 201710426033.6
• 申請日: 2017-06-08
• 公開（公告）號: CN107177680B
• 公開（公告）日: 2019-02-05
• 發明（設計）人: 姜順日;耿福能;劉彬;吳桃清
• 申請（專利權）人: 四川好醫生攀西藥業有限責任公司
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12N15/11
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.美洲大蠊特異性COI引物，其特征在于：其序列是：

正向引物JmF1：5’-TGCTGAGCTCGGGCAACCA-3’；

反向引物JmR1：5’-CTACTGATCATACGAAAAGGGGA-3’。

2.用于檢測美洲大蠊的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒含有權利要求1所述的引物。

3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括dNTPs、Taq DNA聚合酶、Mg2+、PCR反應緩沖液中的至少一種。

4.根據權利要求2或3所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括標準陽性模板。

5.根據權利要求1所述引物或者權利要求2-4任一項所述試劑盒在檢測美洲大蠊中的應用。

6.美洲大蠊的特異性PCR檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)供試品前處理；

2)提取樣品DNA；

3)以步驟2)提取的DNA為模板，利用權利要求1所述的引物JmF1和JmR1進行PCR擴增反應，PCR反應體系以25ul計為：10×PCR含Mg2+緩沖液2.0ul、10×dNTPs 2.0ul、5單位/ulTaq酶0.2ul、模板DNA 2.0ul、5umol/L的正，反向引物各1.0ul、無菌雙蒸水補足至25ul；

4)分析PCR產物。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述PCR擴增反應條件為：94℃預變性5min；94℃變性30s，65℃退火30s，72℃延伸45s，共35個循環。