[發(fā)明專利]有機(jī)磷半抗原和寬譜多特異性抗原、抗體及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710424121.2
• 申請日: 2017-06-07
• 公開（公告）號(hào): CN107337690B
• 公開（公告）日: 2019-12-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉輝;熊波;張燕;劉輝;朱小鈿;韓振亞;陳磊;謝莊擎;陳啟鐫;梁祖培;蘇煥斌;邱國棟;羅永潮;葉為果;陳志波;楊錫倫;吳偉峰;潘振朝;趙丹霞
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院
• 主分類號(hào): C07F9/18
• 分類號(hào): C07F9/18;C07F9/17;C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;G01N33/566;G01N33/535
• 代理公司: 44102 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司
• 代理人: 任重

本發(fā)明公開了一種有機(jī)磷半抗原和有機(jī)磷寬譜多特異性人工抗原、抗體及其制備方法及應(yīng)用。本發(fā)明克服現(xiàn)有有機(jī)磷農(nóng)藥殘留免疫分析方法的技術(shù)不足，提供了一種有機(jī)磷寬譜多特異性的免疫分析思路，針對有機(jī)磷農(nóng)藥，方法準(zhǔn)確度和靈敏度很好，可用于農(nóng)產(chǎn)品和食品樣品中有機(jī)磷的檢測，實(shí)現(xiàn)通用寬譜多特異性檢測，實(shí)際使用中非常方便快捷。所述有機(jī)磷寬譜多特異性抗原具有式（Ⅲ）所示的結(jié)構(gòu)：（Ⅲ）。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及食品安全技術(shù)領(lǐng)域，更具體地，涉及一種有機(jī)磷半抗原、有機(jī)磷寬譜多特異性人工抗原、抗體及其制備方法及應(yīng)用。

背景技術(shù)

有機(jī)磷農(nóng)藥屬有機(jī)磷酸酯類化合物，具有廣譜、高效、量小以及作用方式多、使用方便、半衰期短等優(yōu)點(diǎn)，是目前用量最大，應(yīng)用面最廣的農(nóng)藥。然而由于在生產(chǎn)、運(yùn)輸以及在農(nóng)業(yè)中濫用，引起了嚴(yán)重的環(huán)境問題。有機(jī)磷農(nóng)藥對人、畜都具有較強(qiáng)的毒副作用，可經(jīng)過皮膚、呼吸以及腸胃吸收等途徑進(jìn)入人、畜體內(nèi)，對體內(nèi)膽堿酯酶的活性產(chǎn)生抑制作用，因其可與膽堿酯酶迅速結(jié)合，形成磷?；憠A酯酶，失去催化水解乙酰膽堿的能力，結(jié)果使大量的乙酰膽堿在體內(nèi)蓄積，導(dǎo)致乙酰膽堿為傳導(dǎo)介質(zhì)的膽堿能神經(jīng)處于過度興奮狀態(tài)而出現(xiàn)中毒癥狀。

現(xiàn)行有機(jī)磷農(nóng)藥的檢測方法主要包括儀器檢測法和免疫檢測法，其中免疫檢測法由于具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、前處理簡單、檢驗(yàn)周期短、適用于大批量樣品檢測等優(yōu)點(diǎn)，已成為近年來研究的熱點(diǎn)。

有機(jī)磷在結(jié)構(gòu)上大體可以分為兩類，甲氧基有機(jī)磷（CH₃O）₂P（X）Y和乙氧基有機(jī)磷（C₂H₅O）₂P（X）Y，X代表O或S，Y代表一系列化學(xué)結(jié)構(gòu)。在實(shí)際使用過程中，并不能在第一時(shí)間了解到需要檢測的農(nóng)藥是哪一種或者哪一小類農(nóng)業(yè)的殘留。

因?yàn)槭艿骄窒尢禺愋缘乃季S定勢的限制，本領(lǐng)域現(xiàn)有的免疫分析技術(shù)長期以來通常是特定針對甲氧基有機(jī)磷或者特定針對乙氧基有機(jī)磷的特異性檢測，或者針對甲氧基有機(jī)磷農(nóng)藥的其中一種農(nóng)藥的免疫法檢測，也就是說，免疫分析方法只適用于一種或某一小類農(nóng)藥的檢測，難以滿足高通量、多殘留的檢測需要，在抗原的設(shè)計(jì)上應(yīng)使其更具有通用性，避免無用的重復(fù)勞動(dòng)。因此開發(fā)一種具有多特性有機(jī)磷的快速檢測方法具有重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有有機(jī)磷農(nóng)藥殘留免疫分析方法的技術(shù)

不足，提供一種有機(jī)磷半抗原Ⅰ，所述有機(jī)磷半抗原Ⅰ可應(yīng)用于制備有機(jī)磷寬譜多特異性抗原。

本發(fā)明要解決的另一技術(shù)問題是提供一種有機(jī)磷半抗原Ⅱ，所述有機(jī)磷半抗原Ⅱ可應(yīng)用于制備有機(jī)磷寬譜多特異性抗原。

本發(fā)明要解決的主要技術(shù)問題是提供一種有機(jī)磷寬譜多特異性抗原。

本發(fā)明要解決的還一技術(shù)問題是提供所述有機(jī)磷寬譜多特異性抗原的制備方法。

本發(fā)明還一要解決的技術(shù)問題是提供所述有機(jī)磷寬譜多特異性抗原的應(yīng)用。

本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：

提供一種應(yīng)用于制備有機(jī)磷寬譜多特異性抗原的有機(jī)磷半抗原Ⅰ，其具有式（Ⅰ）所示的結(jié)構(gòu)：

（Ⅰ）。

本發(fā)明同時(shí)提供所述有機(jī)磷半抗原Ⅰ的制備方法，包括以下步驟：

S01.于冰水浴中，向三氯硫磷中緩慢滴加無水甲醇，進(jìn)行反應(yīng)，然后將反應(yīng)液倒入冰水中振搖兩次，取下層有機(jī)相用無水硫酸鈉進(jìn)行干燥，產(chǎn)物冷藏備用；

S02.于冰水浴下，向粉狀氫氧化鈉和無水甲醇混合液中緩慢滴加步驟S01制備的產(chǎn)物進(jìn)行反應(yīng)；待反應(yīng)結(jié)束后，向反應(yīng)液中加入冷鹽酸振搖一次，用水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，產(chǎn)物冷藏備用；