[發明專利]有機磷半抗原和寬譜多特異性抗原、抗體及其制備方法和應用有效
| 申請號： | 201710424121.2 | 申請日： | 2017-06-07 |
| 公開（公告）號： | CN107337690B | 公開（公告）日： | 2019-12-17 |
| 發明（設計）人： | 劉輝;熊波;張燕;劉輝;朱小鈿;韓振亞;陳磊;謝莊擎;陳啟鐫;梁祖培;蘇煥斌;邱國棟;羅永潮;葉為果;陳志波;楊錫倫;吳偉峰;潘振朝;趙丹霞 | 申請（專利權）人： | 廣東產品質量監督檢驗研究院 |
| 主分類號： | C07F9/18 | 分類號： | C07F9/18;C07F9/17;C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;G01N33/566;G01N33/535 |
| 代理公司： | 44102 廣州粵高專利商標代理有限公司 | 代理人： | 任重 |
| 地址： | 510330 廣東省*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 有機磷 半抗原 寬譜多 特異性 抗原 抗體 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種有機磷寬譜多特異性抗原，其特征在于，其具有式(Ⅲ)所示的結構：
2.權利要求1所述有機磷寬譜多特異性抗原的制備方法，其特征在于，是采用活潑酯法將式(Ⅰ)所示有機磷半抗原Ⅰ和載體蛋白先進行偶聯，然后將偶聯后的產物繼續通過活潑酯化法與式(Ⅱ)所示有機磷半抗原Ⅱ進行偶聯，制備獲得有機磷寬譜多特異性抗原，
3.根據權利要求2所述有機磷寬譜多特異性抗原的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
S1.將式(Ⅰ)所示有機磷半抗原Ⅰ溶于DMF中，形成混合溶液，然后加入EDC和NHS于室溫下攪拌進行反應，待反應結束后，將反應液加入到載體蛋白的磷酸鹽緩沖溶液中，于室溫下繼續反應，反應結束后，將反應液于室溫下透析，即制得有機磷完全抗原Ⅰ；
S2.將式(Ⅱ)所示有機磷半抗原Ⅱ溶于DMF中，形成混合溶液，然后加入EDC和NHS，于室溫下攪拌進行反應；
S3.將步驟S1制得的有機磷抗原Ⅰ溶于DMF溶液中，然后加入步驟S2制備的反應液，于室溫下進行反應，待反應結束后，將反應液進行透析，即制得所述有機磷寬譜多特異性抗原。
4.根據權利要求3所述有機磷寬譜多特異性抗原的制備方法，其特征在于，步驟S1所述有機磷半抗原Ⅰ與載體蛋白的偶聯比為20:1；
步驟S1所述有機磷半抗原Ⅰ與EDC和NHS的反應時間為8～24h；
步驟S1所述有機磷半抗原Ⅰ與載體蛋白的反應時間為6～24h；
步驟S2所述反應時間為8～12h；
步驟S3所述有機磷半抗原Ⅱ與有機磷半抗原Ⅰ的質量比為13.5:1；
步驟S3所述反應時間為6～8h；
所述DMF、EDC和NHS的質量比按照10:2:1確定。
5.權利要求1所述有機磷寬譜多特異性抗原、采用權利要求2～4任一項所述有機磷寬譜多特異性抗原制備得到的抗體在檢測有機磷農藥中的應用。
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