[發明專利]聚酰胺?胺樹狀大分子與納米金顆粒的復合物作為非病毒載體進行基因轉染的應用方法

在審

• 申請號: 201710422901.3
• 申請日: 2017-06-07
• 公開（公告）號: CN107142281A
• 公開（公告）日: 2017-09-08
• 發明（設計）人: 曹雪雁;史向陽;徐琲;李愛軍;郝欣欣
• 申請（專利權）人: 東華大學
• 主分類號: C12N15/87
• 分類號: C12N15/87;C08G73/02
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司31001
• 代理人: 翁若瑩,王文穎

1.一種聚酰胺-胺樹狀大分子與納米金顆粒的復合物作為非病毒載體進行基因轉染的應用方法，其特征在于，所述樹狀大分子的表面是氨基末端，對其進行化學修飾可降低其毒性并提高轉染效率；其末端連接靶向基團包括葉酸，RGD，透明質酸，能高效地進行基因傳遞。

2.如權利要求1所述的聚酰胺-胺樹狀大分子與納米金顆粒的復合物作為非病毒載體進行基因轉染的應用方法，其特征在于，所述化學修飾的方法為修飾聚乙二醇、修飾環糊精、乙酰化和烷基化的方法中的任意一種或幾種。

3.如權利要求1所述的聚酰胺-胺樹狀大分子與納米金顆粒的復合物作為非病毒載體進行基因轉染的應用方法，其特征在于，所述復合物中Au與G5.NH₂摩爾比為25∶1及以上。

4.如權利要求3所述的聚酰胺-胺樹狀大分子與納米金顆粒的復合物作為非病毒載體進行基因轉染的應用方法，其特征在于，所述復合物中Au與G5.NH₂摩爾比為25∶1、50∶1、75∶1或100∶1。

5.如權利要求1所述的聚酰胺-胺樹狀大分子與納米金顆粒的復合物作為非病毒載體進行基因轉染的應用方法，其特征在于，所述復合物在基因轉染體系中的濃度為1.0～2.0mg/mL。

6.如權利要求1-5任意一項所述的聚酰胺-胺樹狀大分子與納米金顆粒的復合物作為非病毒載體進行基因轉染的應用方法，其特征在于，所述基因傳遞的傳遞外源治療基因包括pDNA，CpG DNA，反義核苷酸，siRNA及ssDNA中的任意一種或幾種。

7.如權利要求6所述的聚酰胺-胺樹狀大分子與納米金顆粒的復合物作為非病毒載體進行基因轉染的應用方法，其特征在于，所述外源治療基因的目標細胞包括癌細胞及體細胞。

8.如權利要求7所述的聚酰胺-胺樹狀大分子與納米金顆粒的復合物作為非病毒載體進行基因轉染的應用方法，其特征在于，所述癌細胞包括HeLa，U87及A549；所述體細胞包括巨噬細胞，T淋巴細胞，B淋巴細胞，樹突狀細胞。

9.如權利要求6所述的聚酰胺-胺樹狀大分子與納米金顆粒的復合物作為非病毒載體進行基因轉染的應用方法，其特征在于，所述復合物與DNA的N/P比為0.5∶1及以上。

10.如權利要求9所述的聚酰胺-胺樹狀大分子與納米金顆粒的復合物作為非病毒載體進行基因轉染的應用方法，其特征在于，所述復合物與DNA的N/P比為0.5∶1、1∶1、2.5∶1、5∶1或7∶1。

11.如權利要求6所述的聚酰胺-胺樹狀大分子與納米金顆粒的復合物作為非病毒載體進行基因轉染的應用方法，其特征在于，所述pDNA是從大腸桿菌中提取的，質粒為攜帶卡那霉素抗性基因并帶有綠色熒光蛋白報告基因的質粒；所述CpG DNA是由人工合成，序列為5’-TCCATGACGTTCCTGATGCT-3’。

12.如權利要求1所述的聚酰胺-胺樹狀大分子與納米金顆粒的復合物作為非病毒載體進行基因轉染的應用方法，其特征在于，所述基因轉染的轉染時間為4～12h。