[發明專利]玫瑰花渣活性部位萃取方法及其應用

有效

• 申請號: 201710421464.3
• 申請日: 2017-06-07
• 公開（公告）號: CN107028842B
• 公開（公告）日: 2020-03-31
• 發明（設計）人: 畢躍峰;劉文亞;徐麗華
• 申請（專利權）人: 鄭州大學
• 主分類號: A61K8/9789
• 分類號: A61K8/9789;A61K8/368;A61Q19/08;A61Q19/02;C07C51/42;C07C51/43;C07C65/03;A23L3/3463
• 代理公司: 鄭州優盾知識產權代理有限公司 41125
• 代理人: 孫詩雨

1.一種玫瑰花渣活性部位的應用，其特征在于：所述玫瑰花渣活性部位DRFR-A作為制備沒食子酸結晶的應用，所述玫瑰花渣活性部位指通過玫瑰花渣活性部位萃取方法制備得到的；

所述玫瑰花渣活性部位的萃取方法，步驟為：

（1）玫瑰花渣浸膏的制備；具體操作為：取玫瑰花渣，加入8~12倍重量的酶解液，浸泡30~60min，組織破碎法提取3次，每次3分鐘，用八層紗布過濾，合并濾液，經多級閃蒸器回收溶劑，濃縮成膏；

所述酶解液為2 W/V %纖維素酶、1 W/V %半纖維素酶、0.5 W/V %果膠酶和0.5 W/V %離析酶，pH為6.5；

（2）梯度萃取玫瑰花渣浸膏，分離有機相和水相，從有機相得到活性部位DRFR-A和活性部位DRFR-B；具體操作為：取經步驟（1）得到的玫瑰花渣浸膏，加水制成混懸，使之比重在1.0~1.3，分別用乙酸乙酯溶液和乙酸乙酯-乙醇混合溶液進行萃取，萃取結束后，回收有機溶劑，于55℃烘箱里干燥至恒重，將經乙酸乙酯溶液萃取的活性部位命名為DRFR-A，經乙酸乙酯-乙醇混合溶液萃取的活性部位命名為DRFR-B；所述乙酸乙酯溶液和乙酸乙酯-乙醇混合溶液均采用梯度溶劑量進行萃取；乙酸乙酯：乙醇的體積比為（1~10）:（1~10）；

（3）從步驟（2）中的水相中分離沉淀、純化制得活性部位DRFR-C；具體操作為：將經步驟（2）萃取剩下的水相加入體積分數為95%乙醇，使乙醇的體積分數為65%～85%，靜置8~12小時，經抽濾得到沉淀，于55℃烘箱內干燥至恒重，將沉淀命名為活性部位DRFR-C；

（4）對步驟（2）中的水相進行抽濾并回收濾液、純化制得活性部位DRFR-D；具體操作為：將經步驟（2）萃取剩下的水相加入體積分數為95%乙醇，使乙醇的體積分數為65%～85%，靜置8~12小時，經抽濾后，對抽濾的溶液進行旋干，于55℃烘箱里干燥至恒重，將此部位命名為活性部位DRFR-D；

利用玫瑰花渣活性部位DRFR-A制備沒食子酸結晶的方法如下：

（1）在DRFR-A部位中加入石油醚-乙酸乙酯混合溶劑制得DRFR-A混合液，超聲萃取3~5次后，剩下的部分用體積分數為50%～70%的乙醇溶解得混合液Ⅱ，濃縮至混合液Ⅱ體積的（1/2～1/3），移至4℃冰箱內靜置12~18 h，離心后除去上清液，即得沒食子酸粗品；石油醚：乙酸乙酯的體積比為（1~10）:（1~10），石油醚-乙酸乙酯混合溶劑的加入量為：以1g DRFR-A部位為基準，加入4~8mL石油醚-乙酸乙酯混合溶劑；

（2）取步驟（1）制得的沒食子酸粗品，用二氯甲烷-甲醇混合溶劑溶解后，于10~20℃條件下，置于真空箱中，8小時后，收集瓶壁上的針狀晶體；二氯甲烷：甲醇的體積比為（10～20）:（0.5～4.5），二氯甲烷-甲醇混合溶劑的加入量：以1g沒食子酸粗品為基準，加入4~8mL二氯甲烷-甲醇混合溶劑；

（3）重復步驟（2）兩次，收集瓶壁上無色透明的針狀結晶，即得沒食子酸結晶。

2.權利要求1所述的玫瑰花渣活性部位DRFR-A、DRFR-B或DRFR-C在制備抗氧化產品中的應用。

3.權利要求1所述的玫瑰花渣活性部位DRFR-A在制備抗酪氨酸酶產品中的應用。