[發(fā)明專利]一種野生葦蘑人工培殖的方法及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710420911.3
• 申請(qǐng)日: 2017-06-07
• 公開（公告）號(hào): CN107211727B
• 公開（公告）日: 2019-10-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉西周;郭成金;呂紹生;李兆江
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津師范大學(xué)
• 主分類號(hào): A01G18/00
• 分類號(hào): A01G18/00
• 代理公司: 天津市杰盈專利代理有限公司 12207
• 代理人: 朱紅星

1.一種野生葦蘑人工培殖的方法，其特征在于按如下的步驟進(jìn)行：

（1）母種純培養(yǎng)物的分離

將采集到的野生葦蘑新鮮子實(shí)體外表用無(wú)菌水沖洗干凈，然后用75%酒精消毒后晾干，移至超凈臺(tái)內(nèi)，無(wú)菌條件下用鑷子于菌柄與菌蓋交接部位取綠豆大小組織塊，接種于母種培養(yǎng)基平板內(nèi)，用封口膜將培養(yǎng)皿封口后于29℃恒溫培養(yǎng)10天可以獲得淺黃色稀疏菌落即為母種純培養(yǎng)物；

（2）葦蘑母種純培養(yǎng)物及其菌絲體液體培養(yǎng)條件

將母種純培養(yǎng)物無(wú)菌條件下接種于葦蘑母種培養(yǎng)基中，葦蘑母種培養(yǎng)基為:馬鈴薯200g,瓊脂20 g，葡萄糖20 g，硫酸鎂1.5 g，磷酸二氫鉀3 g,維生素B₁10mg，水1000 mL, pH自然；將長(zhǎng)滿平板的葦蘑母種純培養(yǎng)物無(wú)菌條件下轉(zhuǎn)接于葦蘑菌絲體液體培養(yǎng)基上，菌絲體液體培養(yǎng)基為:蔗糖20 g/L，酵母粉6 g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5 g/L，KH₂PO₄ 1 g/L，維生素B₁0.012 g/L，適宜菌絲生長(zhǎng)的pH為5-7；適宜菌絲體生長(zhǎng)溫度范圍19-34℃；恒溫、黑暗避光，培養(yǎng)15-20天即可長(zhǎng)滿75mm平板；

（3）培養(yǎng)料配方：將長(zhǎng)滿平板的葦蘑母種純培養(yǎng)物無(wú)菌條件下接種于野生葦蘑育菇培養(yǎng)料菌袋中，野生葦蘑育菇培養(yǎng)料配方為52%稻草、24%麩皮、24%原土,含水量65%，pH自然；

（4）出菇菌棒發(fā)菌：將接種完葦蘑母種純培養(yǎng)物菌袋于29℃恒溫、黑暗避光，濕度60%，培養(yǎng)30-35天即可長(zhǎng)滿菌袋；

（5）菌絲體向原基轉(zhuǎn)化條件的建立：將長(zhǎng)滿袋菌絲體于25℃培養(yǎng)12h，然后15℃培養(yǎng)12h，持續(xù)溫差10℃刺激7-10天，即有原基大量產(chǎn)生；

（6）子實(shí)體培殖條件：將已經(jīng)原基轉(zhuǎn)化并具有大量原基的菌袋于25℃恒溫條件下，濕度85-90%，1000-1500lx散射光，培殖10-15天即可獲得子實(shí)體；其中所述的適宜菌絲體生長(zhǎng)溫度為29℃，恒溫、黑暗避光，培養(yǎng)15-20天；所述的人工培殖獲得葦蘑子實(shí)體形態(tài)學(xué)特征描述：子實(shí)體肉質(zhì)，柔軟，易腐敗，菌蓋直徑大小5-10cm、菌蓋淺黃色、菌蓋光滑無(wú)鱗片、肉質(zhì)，中央凹陷，成熟后邊緣成波浪狀卷曲、菌褶蠟質(zhì)邊緣尖銳，延生、稀疏分布、有向菌蓋變寬的趨勢(shì)，菌柄位置為中生、中實(shí)、無(wú)菌環(huán)、菌托，成熟后孢子印白色。

2.權(quán)利要求1所述人工培殖的方法，其中所述的人工培殖獲得葦蘑子實(shí)體，具有SEQ IDNO:1所示的核苷酸序列。

3.采用權(quán)利要求1所述野生葦蘑人工培殖方法在提高人工馴化天津七里海地區(qū)葦蘑方面的應(yīng)用。