[發明專利]等離子體處理靈芝孢子以提高三萜和多糖釋放量的方法

在審

• 申請號: 201710418338.2
• 申請日: 2017-06-06
• 公開（公告）號: CN107242542A
• 公開（公告）日: 2017-10-13
• 發明（設計）人: 黃青;馬玉涵;何華奇;姚國華
• 申請（專利權）人: 中國科學院合肥物質科學研究院
• 主分類號: A23L31/00
• 分類號: A23L31/00;A23L5/30;G01N21/31
• 代理公司: 合肥市浩智運專利代理事務所(普通合伙)34124
• 代理人: 王志興

技術領域

本發明涉及保健食品處理制備技術，尤其涉及一種等離子體處理靈芝孢子以提高三萜和多糖釋放量的方法。

背景技術

靈芝是一種食藥兩用的真菌，具有很高的藥用價值，其靈芝孢子粉的藥用和商業價值尤其受到關注。靈芝孢子是靈芝子實體成熟后產生并彈射的生殖細胞，其中富含有高含量的三萜化合物及較高含量的靈芝多糖類，是孢子粉具有藥用價值的核心。然而，靈芝孢子被堅硬的幾丁質和纖維素構成的雙層孢子壁外殼包被，嚴重阻礙了其中活性成分的釋放。在正常情況下，人體消化道中的環境無法將靈芝孢子的外被消化掉，致使其活性成分無法釋放出來為人體利用。因此，需要對孢子進行破壁處理。

對此，目前比較常見的靈芝孢子粉破壁方法包括物理機械破壁法、生物酶解法、化學破壁法。但是，上述方法存在一定問題：化學破壁法存在添加化學物質殘存，安全性存疑，目前使用較少；生物酶解法存在破壁率低等問題；常用的機械破壁法存在鉛、砷、汞、鉻、鎳等重金屬殘留等問題。除此之外，靈芝孢子的崩解也導致了其有效成分可能會揮發到空間中，沾染到包裝上，造成一定的損失。

等離子體(plasma)是由電離后產生的正負離子組成的氣體狀物質，其主要作用包括清潔、蝕刻和改性等方面。等離子體作用于靈芝孢子粉，可以起到滅菌和表面蝕刻等作用，一方面抑制孢子粉中微生物的增殖，提高了使用的安全性，另一方面也在其表面起到了蝕刻效果，常溫下的處理過程增加了其中活性成分靈芝三萜和靈芝多糖的釋放，但又保證孢子外殼的完整性，減少了有效成分的損失，使其成分緩慢釋放出來，并提高了機體的利用效率。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供了一種穩定高效的等離子體處理靈芝孢子以提高三萜和多糖釋放量的方法。

本發明是通過以下技術方案實現的：一種等離子體處理靈芝孢子以提高三萜和多糖釋放量的方法，包括如下步驟：

(1)靈芝孢子粉的預處理；

(2)等離子體放電處理過程；

(3)處理后靈芝孢子粉中靈芝三萜釋放量對比檢測；

(4)處理后靈芝孢子粉中靈芝多糖釋放量對比檢測。

作為本發明的優選方式之一，所述步驟(1)中靈芝孢子粉的預處理方法為：收集優良菌種的靈芝孢子，利用無菌水清洗；2000-5000rpm離心后，留取沉淀的靈芝孢子。

作為本發明的優選方式之一，所述步驟(2)中進行等離子體放電處理前，對步驟(1)所得的靈芝孢子進行分散處理。

作為本發明的優選方式之一，所述分散處理具體方法為：將步驟(1)所得的靈芝孢子注入玻璃平皿表面，用滅菌后的玻璃涂棒在表面涂布均勻，保證玻璃平皿內液體厚度不超過1mm；超凈臺中完全風干后，用滅菌后的玻璃涂棒將玻璃平皿中表面不平的位置涂抹平整。

作為本發明的優選方式之一，所述步驟(2)中等離子體放電處理過程的進行采用等離子體放電裝置進行，具體方法為：采用低氣壓介質阻擋放電，處理時，將步驟(1)所得的靈芝孢子平鋪于等離子體放電裝置的無菌玻璃平皿中，置于反應腔室內，反應腔室通抽氣泵抽氣而保持2000pa以下的氣壓，同時控制通入放電氣體作為擊穿氣體，放電電壓為1.5-2kV，在200-600瓦功率范圍條件下，處理5-10min。

作為本發明的優選方式之一，所述放電氣體具體為空氣、氮氣、氦氣和氬氣中的一種。

作為本發明的優選方式之一，所述步驟(3)中靈芝三萜釋放量對比檢測過程具體采用高氯酸-香草醛法測定。

作為本發明的優選方式之一，所述高氯酸-香草醛法測定靈芝孢子中靈芝三萜釋放量對比檢測的具體方法為：

(1)齊墩果酸測定應用液的配制：取齊墩果酸對照品適量，加甲醇制成每1mL含0.2mg的溶液，即得；

(2)標準曲線的制定：量取齊墩果酸對照品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL，分別置于具塞試管中，揮干，放冷，加入新配制的香草醛冰醋酸溶液(稱取香草醛0.5g，加冰醋酸使溶解成10mL，即得)0.2mL、高氯酸0.8mL，搖勻，在65-75℃水浴中加熱12-18分鐘，立即置冰浴中冷卻4-6分鐘，取出，加入乙酸乙酯4mL，搖勻，以相應試劑為空白，依照紫外-可見分光光度法，在546nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標繪制標準曲線；