[發明專利]用于肝細胞分離實驗的灌流液灌注方法在審
| 申請號： | 201710413738.4 | 申請日： | 2017-06-05 |
| 公開（公告）號： | CN108048389A | 公開（公告）日： | 2018-05-18 |
| 發明（設計）人： | 李陽;高毅;潘明新;彭青;徐小平;蔣澤生;程遠;張斌斌 | 申請（專利權）人： | 南方醫科大學珠江醫院 |
| 主分類號： | C12N5/071 | 分類號： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 北京市立方律師事務所 11330 | 代理人： | 劉延喜;王增鑫 |
| 地址： | 510282 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 肝細胞 分離 實驗 灌流 灌注 方法 | ||
1.用于肝細胞分離實驗的灌流液灌注方法，其特征在于，包括：在肝組織塊的表面選出多個穿刺區，每個所述穿刺區內選取至少三個穿刺點用于灌注灌流液；
在所述穿刺點的位置將注射器的注射口刺入所述肝組織塊，并勻速灌注前灌流液，直至所述肝組織塊由暗紅色逐漸變為灰白色且流出的前灌流液變清亮，以去除所述肝組織塊的血竇內的血細胞及非實質細胞；
再用注射器在所述穿刺區刺入所述肝組織塊，并勻速灌流后灌流液，直至所述肝組織塊變疏松、失去彈性，且表面呈龜背狀裂隙；
停止灌流，至此灌注完成。
2.根據權利要求1所述的灌流液灌注方法，其特征在于，所述穿刺區選取在所述肝組織塊上帶有包膜的包膜區。
3.根據權利要求1所述的灌流液灌注方法，其特征在于，所述穿刺區均勻的分布于所述肝組織塊的表面。
4.根據權利要求1所述的灌流液灌注方法，其特征在于，在所述肝組織塊的表面選出多個穿刺區之前，還包括：用清洗液清洗待灌流的肝組織塊表面的血污。
5.根據權利要求1所述的灌流液灌注方法，其特征在于，同一所述穿刺區內的多個所述穿刺點以不同的深度刺入所述肝組織塊。
6.根據權利要求1所述的灌流液灌注方法，其特征在于，所述前灌流液的灌流速度為20ml/min。
7.根據權利要求1所述的灌流液灌注方法，其特征在于，所述肝組織塊放置于恒溫環境中，以保持所述前灌流液和所述后灌流液灌流過程中的溫度恒定。
8.根據權利要求4所述的灌流液灌注方法，其特征在于，所述清洗液為D-Hank’s液。
9.根據權利要求1所述的灌流液灌注方法，其特征在于，所述前灌流液為預熱的無鈣平衡鹽溶液。
10.根據權利要求1所述的灌流液灌注方法，其特征在于，所述后灌流液為預熱的Ⅱ型膠原酶溶液。
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