[發明專利]獲得與低分子含氮有機化合物特異性結合的適配體的方法

在審

• 申請號: 201710412759.4
• 申請日: 2017-06-05
• 公開（公告）號: CN108118060A
• 公開（公告）日: 2018-06-05
• 發明（設計）人: 小野寺真里
• 申請（專利權）人: 松下知識產權經營株式會社
• 主分類號: C12N15/115
• 分類號: C12N15/115;C12N15/10
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 曾禎;段承恩

本發明的課題是提供通過電泳法從DNA文庫獲得與低分子含氮有機化合物特異性地結合的適配體的方法。本發明的解決課題的方法是與低分子含氮有機化合物特異性地結合的適配體的獲得方法，該方法具備以下工序：工序(a)，制備含有所述低分子含氮有機化合物和DNA文庫的水溶液，工序(b)，通過使用電滲流抑制毛細管的電泳將所述水溶液分級，得到含有復合物的級分，所述復合物包含所述DNA文庫所含的單鏈DNA和所述低分子含氮有機化合物，和工序(c)，通過PCR法擴增所述復合物所含的單鏈DNA，將所述擴增而得的單鏈DNA作為所述與低分子含氮有機化合物特異性地結合的適配體獲得。

技術領域

本發明涉及通過電泳法獲得與低分子含氮有機化合物特異性地結合的適配體的方法。

背景技術

適配體(aptamer)是指能夠與規定的分子特異性地結合的核酸分子。非專利文獻1公開了用5’-HS-(CH₂)₁₁-AGACAAGGAAAATCCTTCAATGAAGTGGGTCG-(CH₂)₇-MB-3’(序列號：04，“MB”表示亞甲藍)表示的適配體。非專利文獻1所公開的適配體與可卡因特異性地結合。

專利文獻1公開了單堿基突變體的檢測方法。

現有技術文獻

專利文獻

專利文獻1：日本特開2009-038983號公報

非專利文獻

非專利文獻1：James S.Swensen et al,“Continuous,Real-Time Monitoring ofcocaine in Undiluted Blood Serum via a Microfluidic,Electrochemical Aptamer-Based Sensor”Journal of American Chemical Society,2009,131,4262-4266

非專利文獻2：Hidenobu Yaku et.,al.,“Anionic phthalocyanines targetingG-quadruplexes and inhibiting telomerase activity in the presence ofexcessive DNA duplexes”,Chem.Commun.,2010,Vol.46,pp.5740–5742

非專利文獻3：Richard T.Wheelhouse et.al.“Cationic Porphyrins asTelomerase Inhibitors:the Interaction of Tetra-(N-methyl-4-pyridyl)porphinewith Quadruplex DNA”,Journal of the American Chemical Society,1998,120,3261–3262

發明內容

發明所要解決的課題

本發明的目的是提供通過電泳法從DNA文庫獲得與低分子含氮有機化合物特異性地結合的適配體的方法。

用于解決課題的方法

本發明是獲得與低分子含氮有機化合物特異性地結合的適配體的方法，該方法具備以下工序：

工序(a)，制備含有所述低分子含氮有機化合物和DNA文庫的水溶液，

工序(b)，通過使用電滲流抑制毛細管的電泳將所述水溶液分級，得到含有復合物的級分，所述復合物包含所述DNA文庫所含的單鏈DNA和所述低分子含氮有機化合物，

工序(c)，通過PCR法擴增所述復合物所含的單鏈DNA，結合的適配體獲得。

發明的效果