[發(fā)明專利]獲得與低分子含氮有機(jī)化合物特異性結(jié)合的適配體的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710412759.4
• 申請(qǐng)日: 2017-06-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108118060A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-06-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 小野寺真里
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 松下知識(shí)產(chǎn)權(quán)經(jīng)營(yíng)株式會(huì)社
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/115
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/115;C12N15/10
• 代理公司: 北京市中咨律師事務(wù)所 11247
• 代理人: 曾禎;段承恩

本發(fā)明的課題是提供通過(guò)電泳法從DNA文庫(kù)獲得與低分子含氮有機(jī)化合物特異性地結(jié)合的適配體的方法。本發(fā)明的解決課題的方法是與低分子含氮有機(jī)化合物特異性地結(jié)合的適配體的獲得方法，該方法具備以下工序：工序(a)，制備含有所述低分子含氮有機(jī)化合物和DNA文庫(kù)的水溶液，工序(b)，通過(guò)使用電滲流抑制毛細(xì)管的電泳將所述水溶液分級(jí)，得到含有復(fù)合物的級(jí)分，所述復(fù)合物包含所述DNA文庫(kù)所含的單鏈DNA和所述低分子含氮有機(jī)化合物，和工序(c)，通過(guò)PCR法擴(kuò)增所述復(fù)合物所含的單鏈DNA，將所述擴(kuò)增而得的單鏈DNA作為所述與低分子含氮有機(jī)化合物特異性地結(jié)合的適配體獲得。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及通過(guò)電泳法獲得與低分子含氮有機(jī)化合物特異性地結(jié)合的適配體的方法。

背景技術(shù)

適配體(aptamer)是指能夠與規(guī)定的分子特異性地結(jié)合的核酸分子。非專利文獻(xiàn)1公開(kāi)了用5’-HS-(CH₂)₁₁-AGACAAGGAAAATCCTTCAATGAAGTGGGTCG-(CH₂)₇-MB-3’(序列號(hào)：04，“MB”表示亞甲藍(lán))表示的適配體。非專利文獻(xiàn)1所公開(kāi)的適配體與可卡因特異性地結(jié)合。

專利文獻(xiàn)1公開(kāi)了單堿基突變體的檢測(cè)方法。

現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)1：日本特開(kāi)2009-038983號(hào)公報(bào)

非專利文獻(xiàn)

非專利文獻(xiàn)1：James S.Swensen et al,“Continuous,Real-Time Monitoring ofcocaine in Undiluted Blood Serum via a Microfluidic,Electrochemical Aptamer-Based Sensor”Journal of American Chemical Society,2009,131,4262-4266

非專利文獻(xiàn)2：Hidenobu Yaku et.,al.,“Anionic phthalocyanines targetingG-quadruplexes and inhibiting telomerase activity in the presence ofexcessive DNA duplexes”,Chem.Commun.,2010,Vol.46,pp.5740–5742

非專利文獻(xiàn)3：Richard T.Wheelhouse et.al.“Cationic Porphyrins asTelomerase Inhibitors:the Interaction of Tetra-(N-methyl-4-pyridyl)porphinewith Quadruplex DNA”,Journal of the American Chemical Society,1998,120,3261–3262

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明所要解決的課題

本發(fā)明的目的是提供通過(guò)電泳法從DNA文庫(kù)獲得與低分子含氮有機(jī)化合物特異性地結(jié)合的適配體的方法。

用于解決課題的方法

本發(fā)明是獲得與低分子含氮有機(jī)化合物特異性地結(jié)合的適配體的方法，該方法具備以下工序：

工序(a)，制備含有所述低分子含氮有機(jī)化合物和DNA文庫(kù)的水溶液，

工序(b)，通過(guò)使用電滲流抑制毛細(xì)管的電泳將所述水溶液分級(jí)，得到含有復(fù)合物的級(jí)分，所述復(fù)合物包含所述DNA文庫(kù)所含的單鏈DNA和所述低分子含氮有機(jī)化合物，

工序(c)，通過(guò)PCR法擴(kuò)增所述復(fù)合物所含的單鏈DNA，結(jié)合的適配體獲得。

發(fā)明的效果