[發(fā)明專利]一種構(gòu)建的基因VII型新城疫病毒弱毒株

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710404089.1
• 申請(qǐng)日: 2017-05-27
• 公開（公告）號(hào): CN107177560B
• 公開（公告）日: 2020-06-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李明義;孫化露;金紅巖;李思菲;于澤坤;畢云英;劉陽;單學(xué)強(qiáng);欒志舫;馬禮照;李朝陽
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東信得科技股份有限公司;青島信得藥業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): C12N7/00
• 分類號(hào): C12N7/00;C12N15/85;A61K39/17;A61P31/14;C12R1/93
• 代理公司: 青島海昊知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)所有限公司 37201
• 代理人: 曾慶國

1.一種VII型新城疫病毒弱毒株，其特征在于，所述的弱毒株的保藏編號(hào)為CCTCC NO:V201709；

所述的弱毒株是將VII型新城疫病毒的P蛋白的237位和240位的氨基酸分別突變?yōu)樘K氨酸T和異亮氨酸I；同時(shí)將VII型新城疫病毒的F蛋白同時(shí)進(jìn)行弱毒性突變構(gòu)建的；

所述的弱毒株是通過反向遺傳操作方法來構(gòu)建的，所述的反向遺傳操作方法包括如下的步驟：

構(gòu)建表達(dá)T7 RNA聚合酶的細(xì)胞系；

提供基因VII型新城疫病毒NDV拯救過程中需要的輔助重組質(zhì)粒和一個(gè)全基因組重組載體，輔助重組質(zhì)粒分別包含NDV的NP蛋白、P蛋白、F蛋白和L蛋白基因；其中P蛋白的237位和240位的氨基酸分別為T和I；

將輔助重組質(zhì)粒和一個(gè)全基因組重組載體轉(zhuǎn)入到表達(dá)T7 RNA聚合酶的細(xì)胞系中，培養(yǎng)獲得基因VII型新城疫病毒弱毒株；

所述的細(xì)胞系，是將表達(dá)T7 RNA聚合酶的基因與載體PCI-neo連接后轉(zhuǎn)染DF1細(xì)胞獲得的。

2.權(quán)利要求1所述的弱毒株在制備滅活疫苗中的應(yīng)用。