[發(fā)明專利]原發(fā)性免疫缺陷病的致病突變及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710400644.3
• 申請日: 2017-05-31
• 公開（公告）號: CN108977449B
• 公開（公告）日: 2021-11-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王文婧;徐鳳萍;陳海嘯;陳艷
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳華大生命科學(xué)研究院
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C07K14/715;C07K14/80;C12N15/63
• 代理公司: 深圳鼎合誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44281
• 代理人: 彭家恩;羅瑤

本申請公開了與原發(fā)性免疫缺陷病相關(guān)的兩種新的致病突變及其應(yīng)用。上述兩個新的致病突變具體為：1)位于IL2RG基因上的c.220TA突變；2)位于CYBB基因上的c.141+3AT突變。本申請?zhí)峁┑年P(guān)于PID的新的致病突變，為該疾病的診斷和治療了新的可檢測位點；同時，采用本申請?zhí)峁┑脑噭┖校煽焖儆行У臋z測出PID的上述相關(guān)突變。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分子生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，具體涉及原發(fā)性免疫缺陷病的致病突變及其應(yīng)用，具體的，涉及與該病癥相關(guān)的核酸、多肽、載體、重組細胞以及相關(guān)應(yīng)用，還涉及一種能檢測原發(fā)性免疫缺陷病的致病突變的試劑盒。

背景技術(shù)

原發(fā)性免疫缺陷病(Primary immunodeficiency disorder,PID)是免疫系統(tǒng)發(fā)生基因變異，導(dǎo)致免疫細胞和分子功能缺陷的一類疾病，臨床表現(xiàn)為易患感染、惡性腫瘤、過敏、炎癥和自身免疫病。由于PID罕見疾病，加之臨床表型復(fù)雜，臨床醫(yī)生難以在早期確診，使得嚴(yán)重PID患者多于早年死亡；存活病例常因診斷延誤導(dǎo)致反復(fù)嚴(yán)重感染和其他慢性進程，最終發(fā)生器官衰竭和致殘。PID屬罕見病，真實發(fā)病率尚不清楚，近年P(guān)ID發(fā)病率有增高趨勢。由于PID是遺傳異質(zhì)性疾病，臨床表型多變，致病基因多，目前仍有很多其相關(guān)的致病基因和致病突變未被發(fā)現(xiàn)，因此，關(guān)于PID的研究工作仍需不斷深入開展。

發(fā)明內(nèi)容

基于對PID的深入研究，本申請?zhí)岢隽藘蓚€關(guān)于PID的新的致病突變，并對其進行了應(yīng)用領(lǐng)域的相關(guān)研究。

根據(jù)本申請的第一方面，本申請?zhí)峁┝艘环N核酸，該核酸與原發(fā)性免疫缺陷病相關(guān)，該核酸與野生型IL2RG基因相比，存在c.220TA突變；或該核酸與野生型CYBB基因相比，存在c.141+3AT突變。

根據(jù)第二方面，本申請?zhí)峁┝艘环N多肽，該多肽與原發(fā)性免疫缺陷病相關(guān)，該多肽與野生型IL2RG蛋白相比，其存在p.Trp74Arg突變，或該多肽與野生型CYBB蛋白相比，其缺失野生型CYBB蛋白的第48至84位的氨基酸序列。

根據(jù)第三方面，本申請?zhí)峁┝艘环N用于檢測PID致病突變的試劑盒，該試劑盒含有用于檢測IL2RG基因和CYBB基因突變中的至少一種的試劑，其中，上述突變包括：相比野生型IL2RG基因，該突變具有c.220TA突變；相比野生型CYBB基因，該突變具有c.141+3AT突變。

進一步的，上述試劑包括核酸探針和引物中的至少一種。

在本申請的一種具體實施方式中，上述檢測PID基因突變的試劑盒中，該試劑盒中的試劑包括引物對，具體包括如下兩組引物對中的至少一組：1)引物對具有如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的序列，可用于檢測IL2RG基因上的c.220TA突變。2)引物對具有如SEQID NO:3和SEQ ID NO:4所示的序列，可用于檢測CYBB基因上的c.141+3AT突變。

在本申請的一種具體實施方式中，上述檢測PID基因突變的試劑盒中，該所述試劑包括帶有可識別標(biāo)記的核酸探針，所述核酸探針的序列選自如如SEQID NO:5-SEQ ID NO:15所示的序列中的至少一種。其中，如SEQ ID NO:5-SEQID NO:12所示序列，可用于檢測IL2RG基因上的c.220TA突變。如SEQ IDNO:13-SEQ ID NO:15所示的序列，可用于檢測CYBB基因上的c.141+3AT突變。

根據(jù)本申請的第四方面，本申請?zhí)峁┝艘环N載體，該載體包含本申請第一方面所述的核酸。

需要說明的是，載體是指用于將目的基因轉(zhuǎn)移至受體細胞的一種能自我復(fù)制的遺傳載體。本申請?zhí)峁┑妮d體中的目的基因即為本申請第一方面提供的核酸。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，適用于本申請的載體的具體形式是多種多樣的，包括但不限于質(zhì)粒、人工染色體(BAC)、Cosmid等。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)需要選擇合適載體形式。

根據(jù)本申請的第五方面，本申請?zhí)峁┝艘环N重組細胞，該重組細胞通過本申請第四方面所述的載體轉(zhuǎn)化受體細胞而獲得。