[發(fā)明專利]用于制備乙肝疫苗的組合物及其制備方法和應用

在審

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• 申請日: 2017-05-31
• 公開（公告）號: CN107281484A
• 公開（公告）日: 2017-10-24
• 發(fā)明（設計）人: 靳廣毅;王竹林;唐黎;胡云龍
• 申請（專利權）人: 深圳大學
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61K39/29;A61K39/385;A61P1/16;A61P31/20;A61P37/02;C07D473/18;A61K31/52
• 代理公司: 深圳市順天達專利商標代理有限公司44217
• 代理人: 陸軍

技術領域

本發(fā)明涉及乙肝疫苗預防和治療的技術領域，更具體地說，涉及一種用于制備乙肝疫苗的組合物及其制備方法和應用。

背景技術

乙肝疫苗是用于預防乙肝的藥物。疫苗接種后，可刺激免疫系統(tǒng)產生保護性抗體，從而使人體具有了預防乙肝的免疫力，達到預防乙肝感染的目的。但是我國感染乙肝病毒(HBV)的人群有9000萬人，其中慢性乙肝患者有2000萬人。對于慢性乙肝感染者和患者，預防性乙肝疫苗基本無效。因此非常需要一種既能預防又能清除乙肝病毒慢性感染的“治療性乙肝疫苗”。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于提供一種用于制備乙肝疫苗的組合物及其制備方法和應用，解決了現(xiàn)有技術中的乙肝疫苗不能同時預防和清除乙肝病毒慢性感染的問題。

本發(fā)明解決技術問題所采用的技術方案是：一種用于制備乙肝疫苗的組合物，其特征在于，包含免疫激動劑活化酯、HBsAg以及鋁佐劑，其中組成比例為：免疫激動劑活化酯：HBsAg：Al＝n：m：q，HBsAg代表重組乙肝表面抗原，Al代表鋁佐劑中的鋁；n、m、q分別代表免疫激動劑活化酯、HBsAg、Al的摩爾數或重量比，且代表性的摩爾數比為n:m:q＝4:1:18181；其中免疫激動劑活化酯(T7)的結構式如下：

其中，R為OH或SH。

在本發(fā)明的組合物中，HBsAg的氨基酸序列包括200-400個氨基酸，HBsAg的分子量為20000Da-44000Da。

在本發(fā)明的組合物中，HBsAg的氨基酸序列包括200-250個氨基酸；HBsAg的分子量為20000Da-25000Da。

在本發(fā)明的組合物中，HBsAg的氨基酸序列如下：

Met Glu Asn Ile Thr Ser Gly Phe Leu Gly Pro Leu Leu Val Leu Gln Ala Gly Phe Phe Leu Leu Thr Arg Ile Leu Thr Ile Pro Gln Ser Leu Asp Ser Trp Trp Thr Ser Leu Asn Phe Leu Gly Gly Ser Pro Val Cys Leu Gly Gln AsnSer Gln Ser Pro Thr Ser Asn His Ser Pro Thr Ser Cys Pro Pro Ile Cys Pro Gly Tyr Arg Trp Met Gys Leu Arg Arhg Phe Ile Ile Phe Leu Phe Ile Leu Leu Leu Cys Leu Ile Phe Leu Leu Val Leu Leu Asp Tyr Gln Gly Met Leu Pro Val Cys Pro Leu Ile Pro Gly Ser Thr Thr Thr ser Thr Gly Pro Cys Lys Thr Cys Thr Thr Pro Ala Gln Gly Asn Ser Met Phe Pro Ser Cys Cys Cys Thr Lys Pro Thr Asp Gly Asn Cys Thr Cys Ile Pro Ile Pro Ser Ser Trp Ala Phe Ala Lys Tyr Leu Trp Glu Trp Ala Ser Val Arg Phe Ser Trp Leu Ser Leu Leu Val Pro Phe Val Gln Trp Phe Val Gly Leu Ser Pro Thr Val Trp Leu Ser Ala Ile Trp Met Met Trp Tyr Trp Gly Pro Ser Leu Tyr Ser Ile Val Ser Pro Phe Ile Pro Leu Leu Pro Ile Phe Phe Cys Leu Trp Val Tyr Ile。

在本發(fā)明的組合物中，所述鋁佐劑為氫氧化鋁凝膠、磷酸鋁、硫酸鋁、銨明礬或鉀明礬。

在本發(fā)明的組合物中，所述免疫激動劑活化酯的制備方法包括：將反應起始物溶于無水DMF中，分批加入EDC和NHS，室溫反應，將反應液倒入冰水中，抽濾，水洗，干燥，得白色固體狀的免疫激動劑活化酯；所述反應起始物與無水DMF的質量體積比為0.075g/ml-0.1g/ml；所述EDC的加入量與所述反應起始物的質量比為0.45-0.6；所述NHS的加入量與所述反應起始物的質量比為0.25-0.4；

其中，反應起始物的結構式為：

在本發(fā)明的組合物中，室溫反應的時間為1.5h-4h。