[發明專利]基于磷酸化肽段篩選的標記蛋白評價羊肉品質的方法

有效

• 申請號: 201710390205.9
• 申請日: 2017-05-27
• 公開（公告）號: CN107064441B
• 公開（公告）日: 2019-06-28
• 發明（設計）人: 劉永峰;張德權;劉滿順;魏燕超;李欣;李錚
• 申請（專利權）人: 陜西師范大學
• 主分類號: G01N33/12
• 分類號: G01N33/12
• 代理公司: 西安永生專利代理有限責任公司 61201
• 代理人: 高雪霞

1.一種基于磷酸化肽段篩選的標記蛋白評價羊肉品質的方法，其特征在于由以下步驟組成：

（1）采集宰后12小時的高品質羊肉和低品質羊肉樣品；

（2）提取步驟（1）采集樣品中的磷酸化蛋白，并將獲得的磷酸化蛋白酶解，獲得磷酸化肽段；

（3）采用生物質譜對步驟（2）獲得的磷酸化肽段進行定性和定量檢測，以定性后的磷酸化肽段在高品質羊肉中的相對定量值與低品質羊肉中的相對定量值之比的對數值作為判斷肽段磷酸化水平變化的依據，即該對數值大于1則磷酸化水平上調，該對數值小于-1則磷酸化水平下調，該對數值處于1和-1之間則該磷酸化肽段在高品質羊肉和低品質羊肉樣品中的磷酸化水平無顯著變化；

（4）對步驟（3）定性后的磷酸化肽段對應的磷酸化蛋白進行GO富集和磷酸化蛋白KEGG通路分析；

（5）根據步驟（4）的分析結果并結合蛋白質相互作用網絡，將高品質羊肉樣品和低品質羊肉樣品中含量差異顯著的磷酸化蛋白作為標記蛋白；

（6）檢測不同待測羊肉樣品中標記蛋白的含量，根據標記蛋白的含量判斷不同羊肉之間的品質高低：如果標記蛋白為高品質羊肉標記蛋白，則標記蛋白含量越高說明待測羊肉樣品品質越好；如果標記蛋白為低品質羊肉標記蛋白，則標記蛋白含量越高說明待測羊肉樣品品質越差。

2.根據權利要求1所述的基于磷酸化肽段篩選的標記蛋白評價羊肉品質的方法，其特征在于：在步驟（1）中，所述高品質羊肉為羊的背最長肌肉，低品質羊肉為羊的腹部肌肉。

3.根據權利要求1所述的基于磷酸化肽段篩選的標記蛋白評價羊肉品質的方法，其特征在于：在步驟（3）中，所述檢測包括肽段磷酸化位點以及磷酸化水平的檢測。

4.根據權利要求1所述的基于磷酸化肽段篩選的標記蛋白評價羊肉品質的方法，其特征在于：在步驟（5）中，所述高品質羊肉樣品中磷酸化肽段的相對定量值與低高品質羊肉樣品中磷酸化肽段的相對定量值之比的對數值大于1或小于-1，則該磷酸化肽段在高品質羊肉樣品和低高品質羊肉中的含量差異顯著。

5.根據權利要求1所述的基于磷酸化肽段篩選的標記蛋白評價羊肉品質的方法，其特征在于：在步驟（5）中，所述的高品質羊肉的標記蛋白為磷酸果糖激酶、三磷酸異構酶1、丙酮酸激酶、磷酸甘油酸激酶1、果糖二磷酸醛縮酶A和甘油醛-3-磷酸脫氫酶。

6.根據權利要求1所述的基于磷酸化肽段篩選的標記蛋白評價羊肉品質的方法，其特征在于：在步驟（5）中，所述的低品質羊肉的標記蛋白為原肌球蛋白1、肌球蛋白重鏈1、肌球蛋白重鏈2、肌球蛋白重鏈6和肌聯蛋白。