[發明專利]一種海洋真菌來源的苯酚類衍生物的制備方法

有效

• 申請號: 201710382382.2
• 申請日: 2017-05-26
• 公開（公告）號: CN108929885B
• 公開（公告）日: 2021-06-22
• 發明（設計）人: 王長云;邵長倫;王美;信蘭婷
• 申請（專利權）人: 中國海洋大學
• 主分類號: C12P7/22
• 分類號: C12P7/22;C12N1/14;C12R1/80
• 代理公司: 北京中濟緯天專利代理有限公司 11429
• 代理人: 楊樂

本發明涉及一種海洋真菌來源的苯酚類衍生物的制備方法，具體涉及一種同時制備苯酚類衍生物1?3的方法，其特征在于包括以下步驟：先在菌種培養基中對海洋真菌Penicillium purpurogenum進行菌種培養，再在發酵培養基中對上述海洋真菌進行發酵培養，得發酵物后，用乙酸乙酯萃取2–4次，合并乙酸乙酯萃取液后減壓濃縮得粗浸膏，進行色譜分離，分別得到化合物1?3；所述苯酚類衍生物1?3具有如下結構：

技術領域

本發明屬于海洋天然藥物化學領域，涉及一種海洋真菌來源的苯酚類衍生物的制備方法。

背景技術

自從1929年從真菌中制備出青霉素以來，真菌的代謝產物成為了藥物的豐富來源，絕大多數臨床應用的抗生素都來源于真菌和細菌。真菌的代謝產物還有其它的藥用價值，如抗腫瘤，治療心血管疾病，酶抑制劑等。近年來，隨著海洋天然藥物化學的發展，越來越多的具有酶抑制活性的化合物從海洋微生物中不斷分離獲得，為尋找新型酶抑制劑提供了物質基礎。采用人工培養發酵的方法，從海洋微生物中獲得有重要酶抑制活性的次級代謝產物，具有環境友好、可持續發展等特點，能有效解決藥物開發過程中的藥源等關鍵性問題，因此具有獨特優勢。

發明內容

本發明提供一種海洋真菌Penicillium purpurogenum，該真菌分離自蕾二歧燈芯柳珊瑚，其中蕾二歧燈芯柳珊瑚是發明人于2008年9月采自中國北海廣西潿洲島。上述海洋真菌Penicillium purpurogenum的菌種保藏信息：保藏單位名稱：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；保藏單位地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所；保藏日期：2017年5月4日；保藏編號：CGMCC No.13778；分類命名：產紫青霉Penicillium purpurogenum。

本發明的另一實施方案提供一種苯酚類衍生物，其特征在于所述苯酚類衍生物具有化合物1-3所示結構：

本發明的另一實施方案提供一種同時制備化合物1-3的方法，其特征在于包括以下步驟：先在菌種培養基中對海洋真菌Penicillium purpurogenum進行菌種培養，再在發酵培養基中對上述海洋真菌進行發酵培養，得發酵物后，用乙酸乙酯萃取2–4次，合并乙酸乙酯萃取液后減壓濃縮得粗浸膏，進行色譜分離，分別得到化合物1-3；其中所述的菌種培養基中含有葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、瓊脂、粗海鹽、水；所述的發酵培養基中含有大米、粗海鹽、水；所述的色譜分離為依次進行正相硅膠柱色譜分離、反相硅膠柱色譜分離、凝膠柱色譜分離和高效液相色譜分離。

上述制備方法中所述的菌種培養基優選含有葡萄糖1.0％–10％、酵母膏0.1％–4.0％、蛋白胨0.2％–4.0％、瓊脂1.0％–6.0％、粗海鹽3.0％–10％，其余為水，上述百分含量均為重量百分比；培養溫度為15–35℃；培養時間為3–10天；所述的發酵培養基中大米、粗海鹽和水的含量為每個500mL錐形瓶中含有大米50–150g，粗海鹽1–10g，水50–150mL；培養溫度為15–35℃；培養時間為20–50天；所述的正相硅膠柱色譜分離為先采用固定相為100～200目硅膠，流動相為50％–60％(體積百分比，下同)的乙酸乙酯/石油醚混合溶劑，洗脫體積優選為3-5個柱體積，然后再采用的固定相為200～300目硅膠，流動相為50％–55％的二氯甲烷/甲醇混合溶劑，洗脫體積優選為2-3個柱體積；反相硅膠柱色譜分離中采用的固定相優選為C₁₈硅膠，流動相優選為35％–45％(體積百分比)的甲醇/水混合溶劑，洗脫體積優選為2-3個柱體積；凝膠柱色譜分離的固定相為sephadex LH-20，流動相為二氯甲烷，洗脫體積優選為3-5個柱體積；高效液相色譜分離中采用的色譜為半制備C₁₈色譜柱，Kromasil,7μm,10×250mm，流動相為45％–50％的甲醇/水混合溶液。

本發明的另一實施方案中提供一種酶抑制劑，其特征在于包含化合物1、2或3或其藥學上可接受的鹽作為有效成分；還可包括其他酶抑制活性成分和/或藥學上可接受的載體或賦形劑。