[發明專利]一種海洋真菌來源的苯酚類衍生物的制備方法

有效

• 申請號: 201710382382.2
• 申請日: 2017-05-26
• 公開（公告）號: CN108929885B
• 公開（公告）日: 2021-06-22
• 發明（設計）人: 王長云;邵長倫;王美;信蘭婷
• 申請（專利權）人: 中國海洋大學
• 主分類號: C12P7/22
• 分類號: C12P7/22;C12N1/14;C12R1/80
• 代理公司: 北京中濟緯天專利代理有限公司 11429
• 代理人: 楊樂

1.一種同時制備苯酚類衍生物1-3的方法，其特征在于包括以下步驟：先在菌種培養基中對海洋真菌Penicillium purpurogenum進行菌種培養，再在發酵培養基中對上述海洋真菌進行發酵培養，得發酵物后，用乙酸乙酯萃取2–4次，合并乙酸乙酯萃取液后減壓濃縮得粗浸膏，進行色譜分離，分別得到化合物1-3；其中所述的菌種培養基中含有葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、瓊脂、粗海鹽、水；所述的發酵培養基中含有大米、粗海鹽、水；所述的色譜分離為依次進行正相硅膠柱色譜分離、反相硅膠柱色譜分離、凝膠柱色譜分離和高效液相色譜分離；所述苯酚類衍生物1-3結構如下：

所述海洋真菌Penicillium purpurogenum的菌種保藏信息：保藏單位名稱：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；保藏單位地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所；保藏日期：2017年5月4日；保藏編號：CGMCC No.13778；分類命名：產紫青霉Penicillium purpurogenum。

2.權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述的菌種培養基含有葡萄糖1.0％–10％、酵母膏0.1％–4.0％、蛋白胨0.2％–4.0％、瓊脂1.0％–6.0％、粗海鹽3.0％–10％，其余為水，上述百分含量均為重量百分比；培養溫度為15–35℃；培養時間為3–10天。

3.權利要求1-2任一項所述的制備方法，其特征在于所述的發酵培養基中大米、粗海鹽和水的含量為每個500mL錐形瓶中含有大米50–150g，粗海鹽1–10g，水50–150mL；培養溫度為15–35℃；培養時間為20–50天。

4.權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述的正相硅膠柱色譜分離為先采用固定相為100～200目硅膠，流動相為50％–60％的乙酸乙酯/石油醚混合溶劑，洗脫體積為3-5個柱體積，然后再采用的固定相為200～300目硅膠，流動相為50％–55％的二氯甲烷/甲醇混合溶劑，洗脫體積為2-3個柱體積；上述流動相混合溶劑的百分比均為體積百分比。

5.權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述的反相硅膠柱色譜分離中采用的固定相為C₁₈硅膠，流動相為35％–45％的甲醇/水混合溶劑，洗脫體積為2-3個柱體積；上述流動相混合溶劑的百分比均為體積百分比。

6.權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述的凝膠柱色譜分離的固定相為sephadex LH-20，流動相為二氯甲烷，洗脫體積為3-5個柱體積。

7.權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述的高效液相色譜分離中采用的色譜為半制備C₁₈色譜柱，Kromasil,7μm,10×250mm，流動相為45％–50％的甲醇/水混合溶液；上述流動相混合溶劑的百分比均為體積百分比。