[發(fā)明專利]一種不含卵黃的人精子冷凍保護液及保存方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710375384.9
• 申請日: 2017-05-24
• 公開（公告）號: CN107027741B
• 公開（公告）日: 2020-12-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 岳煥勛;蔣敏;李福平;林麗
• 申請（專利權(quán)）人: 四川大學(xué)華西第二醫(yī)院
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 成都正華專利代理事務(wù)所(普通合伙) 51229
• 代理人: 李蕊;何凡

1.一種不含卵黃的人精子冷凍保護液，其特征在于，包括以下組分且在保存人精子時各組分的終濃度為：氯化鈉90~110mmol/L、氯化鉀5~6mmol/L、硫酸鎂0.2~0.5mmol/L、氯化鈣2~4mmol/L、磷酸二氫鈉0.2~0.5mmol/L、碳酸氫鈉28~35mmol/L、甘氨酸110~150mmol/L、4-羥乙基哌嗪乙磺酸18~25mmol/L、葡萄糖5~8mmol/L、蔗糖30~60mmol/L、乳酸鈉12~15mmol/L、甘油50~100mL/L，余量為超純水。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的不含卵黃的人精子冷凍保護液，其特征在于，包括以下組分且在保存人精子時各組分的終濃度為：氯化鈉100mmol/L、氯化鉀5.365mmol/L、硫酸鎂0.49mmol/L、氯化鈣2.72mmol/L、磷酸二氫鈉0.31mmol/L、碳酸氫鈉30.95mmol/L、甘氨酸133.2mmol/L、4-羥乙基哌嗪乙磺酸20mmol/L、葡萄糖5.51mmol/L、蔗糖50mmol/L、乳酸鈉12.86mmol/L、甘油70mL/L，余量為超純水。

3.人精子冷凍保存方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）將權(quán)利要求1或2所述的精子冷凍保護液和精液混勻，當精液中精子濃度大于等于150×10⁶/mL時，精子冷凍保護液和精液按體積比為1:1混勻；當精液中精子濃度大于等于100×10⁶/mL而小于150×10⁶/mL時，精子冷凍保護液和精液按體積比為1:2混勻；當精液中精子濃度大于等于60×10⁶/mL而小于100×10⁶/mL時，精子冷凍保護液和精液按體積比為1:3混勻；

（2）將步驟（1）所得混合物在室溫下平衡10~15min，然后按照分段降溫方式靜置15~20min；其中，分段降溫方式為在-20℃靜置5min，接著在-125~-130℃靜置10min；

（3）將步驟（2）所得物轉(zhuǎn)移到-196℃液氮中保存。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的人精子冷凍保存方法，其特征在于，步驟（2）中，在室溫下平衡10min。