[發(fā)明專利]一種激肽釋放酶7在血液中的活性檢測方法及其作為診斷胰腺癌的血清標(biāo)志物上的應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710373623.7 | 申請日： | 2017-05-24 |
| 公開（公告）號： | CN108931650A | 公開（公告）日： | 2018-12-04 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 譚瀟;劉森;鄭軍;李林;張丁 | 申請（專利權(quán)）人： | 宜昌市中心人民醫(yī)院 |
| 主分類號： | G01N33/68 | 分類號： | G01N33/68;G01N33/574 |
| 代理公司： | 宜昌市三峽專利事務(wù)所 42103 | 代理人： | 蔣悅 |
| 地址： | 443000 湖北*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 激肽釋放酶 活性檢測 孵育 搖床 檢測 冰箱 待測血清樣品 血液 發(fā)射光波長 激發(fā)光波長 血清標(biāo)志物 熒光酶標(biāo)儀 診斷胰腺癌 取上清液 血液樣品 液體去除 熒光底物 酶聯(lián)板 吸水紙 血清 分裝 平鋪 稀釋 洗孔 去除 桌面 保存 分配 應(yīng)用 | ||
1.一種標(biāo)志物在血液中的活性檢測方法，其特征在于，該標(biāo)志物是人組織激肽釋放酶7，包括如下步驟：
(1) 所有收集的待測血液樣品按要求于4℃冰箱靜置10-15小時后離心取上清液保存于-80℃冰箱，檢測前一天所有血清樣品用1×PBS液按1：5比例進(jìn)行稀釋分裝待測；
(2) 分配96孔酶聯(lián)板，向每個酶聯(lián)孔內(nèi)加入待測血清樣品，置于搖床上輕搖孵育；
(3) 向每個孔內(nèi)加入klk7抗體于室溫下置于搖床上輕搖孵育；
(4) 去除孔內(nèi)的液體，加入1×wash buffer洗孔，每次加入buffer后放置搖床5min；
(5) 將吸水紙平鋪于桌面，輕拍酶聯(lián)板使孔內(nèi)液體去除干凈；
(6) 加入KLK7 FRET熒光底物McaRPKPVENvalWRK(Dnp)NH2于每孔內(nèi)，使其終濃度為，再于37℃下置于搖床上輕搖孵育；
(7) 于熒光酶標(biāo)儀中在激發(fā)光波長320nm，發(fā)射光波長405nm下進(jìn)行檢測，即可完成標(biāo)志物在血液中的活性檢測。
2.權(quán)利要求1所述的激肽釋放酶7在作為診斷或輔助診斷胰腺癌過程中的血清標(biāo)志物上應(yīng)用。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于宜昌市中心人民醫(yī)院，未經(jīng)宜昌市中心人民醫(yī)院許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201710373623.7/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
