[發明專利]一種檢測異性孿生母牛SRY相對含量的方法

在審

• 申請號: 201710371156.4
• 申請日: 2017-05-23
• 公開（公告）號: CN107058569A
• 公開（公告）日: 2017-08-18
• 發明（設計）人: 曹兵海;蘇華維;邱清華;何陽;邵陶祺;姬琳堡
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司11245
• 代理人: 關暢,何葉喧

1.引物對I，由引物SRY-F和引物SRY-R組成；

所述引物SRY-F為如下(a1)或(a2)：

(a1)序列表的序列1所示的單鏈DNA分子；

(a2)將序列1經過一個或幾個核苷酸的取代且與序列1具有相同功能的DNA分子；

所述引物SRY-R為如下(a3)或(a4)：

(a3)序列表的序列2所示的單鏈DNA分子；

(a4)將序列2經過一個或幾個核苷酸的取代且與序列2具有相同功能的DNA分子。

2.引物組合，由權利要求1中所述的引物對I和引物對II組成；

所述引物對II由引物GAPDH-F和引物GAPDH-R組成；

所述引物GAPDH-F為如下(b1)或(b2)：

(b1)序列表的序列3所示的單鏈DNA分子；

(b2)將序列3經過一個或幾個核苷酸的取代且與序列3具有相同功能的DNA分子；

所述引物GAPDH-R為如下(b3)或(b4)：

(b3)序列表的序列4所示的單鏈DNA分子；

(b4)將序列4經過一個或幾個核苷酸的取代且與序列4具有相同功能的DNA分子。

3.權利要求1所述的引物對I或權利要求2所述的引物組合的應用，為如下(c1)-(c6)任一種：

(c1)檢測SRY相對含量；

(c2)制備用于檢測SRY相對含量的試劑盒；

(c3)檢測異性孿生母牛SRY相對含量；

(c4)制備用于檢測異性孿生母牛SRY相對含量的試劑盒；

(c5)鑒別異性孿生母牛是否可育；

(c6)制備用于鑒別異性孿生母牛是否可育的試劑盒。

4.含有權利要求1所述的引物對I或權利要求2所述的引物組合的試劑盒；所述試劑盒的用途為如下(d1)或(d2)或(d3)：

(d1)檢測SRY相對含量；

(d2)檢測異性孿生母牛SRY相對含量；

(d3)鑒別異性孿生母牛是否可育。

5.如權利要求4所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒還包括2×SYBR Green Master(Rox)和超純去離子水。

6.權利要求4或5所述試劑盒的制備方法，包括將各條引物單獨包裝的步驟。

7.一種檢測異性孿生母牛SRY相對含量的方法，包括如下步驟：分別提取待測異性孿生母牛于待測異性孿生母牛屬于同一品種的正常公牛的基因組DNA；采用實時熒光定量PCR，以GAPDH基因為內參基因，檢測各個基因組DNA中SRY基因的相對含量，以正常公?；蚪MDNA中SRY基因的相對含量為100％，得到待測異性孿生母?；蚪MDNA中SRY基因相對值。

8.一種鑒別異性孿生母牛是否可育的方法，包括如下步驟：分別提取待測異性孿生母牛和與待測異性孿生母牛屬于同一品種的正常公牛的基因組DNA；采用實時熒光定量PCR，以GAPDH基因為內參基因，檢測各個基因組DNA中SRY基因的相對含量，以正常公牛基因組DNA中SRY基因的相對含量為100％，得到待測異性孿生母牛基因組DNA中SRY基因相對值；根據待測異性孿生母牛基因組DNA中SRY基因相對值判斷異性孿生母牛是否可育。