[發明專利]一種新型乳酸片球菌及其應用

有效

• 申請號: 201710367900.3
• 申請日: 2017-05-23
• 公開（公告）號: CN107034163B
• 公開（公告）日: 2020-03-10
• 發明（設計）人: 劉輝;季海峰;張董燕;王四新;王晶;張偉;王雅民
• 申請（專利權）人: 北京市農林科學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/04;A23K10/18;A23K50/30;C12R1/01
• 代理公司: 北京智為時代知識產權代理事務所(普通合伙) 11498
• 代理人: 王加嶺;楊靜

1.一種乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)菌株ZPA017，其保藏號為CGMCCNo.9040。

2.一種豬源乳酸片球菌制劑，其特征在于，含有如權利要求1所述的乳酸片球菌ZPA017。

3.一種飼料添加劑，其特征在于，含有如權利要求2所述的豬源乳酸片球菌制劑。

4.一種豬源乳酸片球菌制劑的制備方法，其特征在于，在液體發酵培養基中發酵權利要求1所述的乳酸片球菌ZPA017，得到發酵液，將所述發酵液進行離心、乳化凍干，制備成的凍干粉為豬源乳酸片球菌制劑。

5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，具體包括如下步驟：

(1)發酵培養：以1％的接種量將所述乳酸片球菌ZPA017接種于MRS液體培養基中，37℃培養24小時，如此活化2代后得到種子培養物；

將種子培養物以5％的接種量接種于裝有液體培養基的發酵罐中，設定溫度37℃、轉速100rpm，維持恒定pH 4.8，當發酵至16小時時開始補料，之后每隔2小時進行一次，共補料5次；

當發酵液pH不再降低時，終止發酵，得到發酵液；

(2)發酵液離心：將所述步驟(1)得到的發酵液在19000rpm離心，得到菌泥；

(3)乳化凍干：將所述步驟(2)得到的菌泥與1/3所述發酵液體積的凍干保護劑混合，高剪切分散乳化機3000r/min乳化30min，分裝于冷凍盤中，厚度2cm左右，預凍3小時，設置真空冷凍干燥機冷凝溫度-60℃、真空度17Pa，凍干24小時后，即得乳酸片球菌制劑。

6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，

所述的液體培養基由如下濃度的物質組成：葡萄糖15g/L，蛋白胨5g/L，牛肉膏5g/L，乙酸鈉5g/L，酵母浸粉2.5g/L，K₂HPO₄·3H2O 2g/L，檸檬酸氫二銨2g/L，MgSO₄·7H₂O 0.58g/L，MnSO₄ 0.19g/L，吐溫-80 1ml/L，pH 6.5；

所述補料液為葡萄糖溶液，濃度為500g/L；

所述凍干保護劑為含有質量百分比濃度分別為8％的海藻糖、16％的脫脂乳、1.5％的L-半胱氨酸、4％的乳糖、1％的谷氨酸鈉、0.5％的L-賴氨酸、5％的糊精和1％的甘油。

7.權利要求2所述乳酸片球菌制劑作為添加劑在飼料中的應用。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，所述飼料為豬飼料。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，所述飼料為仔豬飼料。

10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于，在基礎日糧中添加所述乳酸片球菌制劑，使所述乳酸片球菌在每千克全價仔豬料中的活菌數為1.2×10⁸CFU。