[發(fā)明專利]一種用于治療皮膚損傷的干細(xì)胞軟膏及其制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710366533.5 | 申請日： | 2017-05-23 |
| 公開（公告）號： | CN108938669B | 公開（公告）日： | 2022-04-08 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 王曉燕;蔣斌;徐仁和 | 申請（專利權(quán)）人： | 澳門大學(xué) |
| 主分類號： | A61K35/28 | 分類號： | A61K35/28;A61K9/06;A61K47/38;A61P17/02;C12N5/0775 |
| 代理公司： | 重慶強(qiáng)大凱創(chuàng)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 50217 | 代理人： | 隋金艷 |
| 地址： | 中國澳門氹*** | 國省代碼： | 澳門;82 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 用于 治療 皮膚 損傷 干細(xì)胞 軟膏 及其 制備 方法 | ||
1.一種用于治療皮膚損傷的干細(xì)胞軟膏的制備方法，其特征在于，所述的干細(xì)胞為由人多能干細(xì)胞株分化而成的間充質(zhì)干細(xì)胞株或使用成體組織分離來的間充質(zhì)干細(xì)胞，包括以下三個步驟：
步驟一,干細(xì)胞團(tuán)塊形成步驟，制備干細(xì)胞3D懸浮培養(yǎng)液，在3D懸浮培養(yǎng)條件下，形成干細(xì)胞團(tuán)塊；
步驟二，干細(xì)胞軟膏制備步驟,將無生物毒性的基質(zhì)混合于活性能量液體培養(yǎng)基中形成基質(zhì)軟膏，將步驟一形成的干細(xì)胞團(tuán)塊收集起來置于所述基質(zhì)軟膏中形成干細(xì)胞軟膏，其中，所述的活性能量液體培養(yǎng)基為液體基質(zhì)添加增粘劑混合制成，所述的活性能量基質(zhì)的成分包括DMEM低糖培養(yǎng)基，20％血清替代物，1％非必需氨基酸，5％L－谷氨酰胺，所述的增粘劑為食用級添加劑；
步驟三，干細(xì)胞軟膏制品封裝儲備步驟，在常溫條件下將所述干細(xì)胞軟膏封裝于無菌塑料容器中，
所述的干細(xì)胞軟膏可直接涂抹于皮膚創(chuàng)口上即可發(fā)揮間充質(zhì)干細(xì)胞的生物活性。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干細(xì)胞軟膏的制備方法，其特征在于，在所述的干細(xì)胞團(tuán)塊形成步驟，所述的3D懸浮培養(yǎng)液的組分構(gòu)成包括DMEM低糖培養(yǎng)基，20％胎牛血清或者血清替代物，1％非必需氨基酸，5％L－谷氨酰胺。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的干細(xì)胞軟膏的制備方法，其特征在于，在所述的干細(xì)胞團(tuán)塊形成步驟之前，還包括干細(xì)胞分離獲取子步驟，所述的干細(xì)胞為由人多能干細(xì)胞株分化而成的間充質(zhì)干細(xì)胞株或使用成體組織分離來的間充質(zhì)干細(xì)胞。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的干細(xì)胞軟膏的制備方法，其特征在于，在所述的干細(xì)胞團(tuán)塊形成步驟過程中，還包括干細(xì)胞培養(yǎng)子步驟，其中，在所述的干細(xì)胞培養(yǎng)子步驟中，調(diào)整所述的3D懸浮懸液的細(xì)胞密度至0.5-2×1000000細(xì)胞每毫升，培養(yǎng)時間為24-48小時。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的干細(xì)胞軟膏的制備方法，其特征在于，所述的干細(xì)胞為由人多能細(xì)胞株Envy細(xì)胞分化而來的間充質(zhì)干細(xì)胞株。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的干細(xì)胞軟膏的制備方法，其特征在于，在所述的干細(xì)胞團(tuán)塊形成步驟過程中，還包括胰蛋白酶消化子步驟，其中，胰蛋白酶的體積百分比例為0.05-0.25％，消化時間為至少3分鐘。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的干細(xì)胞軟膏的制備方法，其特征在于，在所述的干細(xì)胞團(tuán)塊形成步驟過程中，在完成所述的胰蛋白酶消化子步驟后，還包括胰蛋白酶中和子步驟及干細(xì)胞離心法收集子步驟，其中，采用新鮮制備的所述3D懸浮培養(yǎng)液中和胰蛋白酶。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干細(xì)胞軟膏的制備方法，其特征在于，在所述的干細(xì)胞軟膏制備步驟,所述的無生物毒性的基質(zhì)為甲基纖維素，將甲基纖維素按終濃度0.2％－0.3％加入活性能量液體培養(yǎng)基形成基質(zhì)軟膏。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的干細(xì)胞軟膏的制備方法，其特征在于，在所述的干細(xì)胞軟膏制品封裝儲備步驟，將干細(xì)胞軟膏制備步驟形成的系胞團(tuán)塊混合懸浮于所述基質(zhì)軟膏中，封裝于1ml注射器中備用，調(diào)整細(xì)胞密度為0.5-2×1000000細(xì)胞每毫升。
10.一種可治療皮膚損傷的干細(xì)胞軟膏，其特征在于，所述的干細(xì)胞軟膏采用如權(quán)利要求1-9任一的方法制備而成。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于澳門大學(xué)，未經(jīng)澳門大學(xué)許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201710366533.5/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
