[發(fā)明專利]一種篩檢細菌的方法及采用特征元素篩檢六種致病菌的方法

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• 申請日: 2017-05-22
• 公開（公告）號: CN107190047A
• 公開（公告）日: 2017-09-22
• 發(fā)明（設計）人: 張鵬
• 申請（專利權）人: 張鵬
• 主分類號: C12Q1/14
• 分類號: C12Q1/14;C12Q1/10;C12Q1/04;G01N27/62;C12R1/445;C12R1/42;C12R1/19;C12R1/01;C12R1/085;C12R1/63
• 代理公司: 深圳市興科達知識產(chǎn)權代理有限公司44260
• 代理人: 易敏

1.一種篩檢細菌的方法，其特征在于：通過檢測細菌中的特征元素，從而實現(xiàn)細菌的快速篩查和鑒別。

2.根據(jù)權利要求1所述的一種篩檢細菌的方法，其特征在于：通過一種或多種所述特征元素對細菌進行鑒別、篩查。

3.根據(jù)權利要求1或2所述的一種篩檢細菌的方法，其特征在于具體步驟為：將已知細菌接種培養(yǎng)后，再將細菌消解、定容，通過電感耦合等離子體質譜儀檢測細菌中常見無機元素的含量，然后對各種細菌中元素的含量進行對比區(qū)分，含量明顯區(qū)別于其他菌的元素選為特征元素，最后將待測細菌進行接種培養(yǎng)后再將細菌消解、定容，并通過電感耦合等離子體質譜儀檢測待測細菌中特征元素的含量進行細菌的篩查和鑒別。

4.根據(jù)權利要求3所述的一種篩檢細菌的方法，其特征在于所述已知菌株和待測菌株的接種培養(yǎng)具體步驟為：將菌株的雌株接種于營養(yǎng)肉湯中，37℃震蕩培養(yǎng)24h，12000r/min離心3min，棄去上清液，用超純水反復洗滌三次后，將菌殘渣放置于-70℃過夜，然后將其置于冷凍離心機中-40℃，抽取36h備用。

5.根據(jù)權利要求3所述的一種篩檢細菌的方法，其特征在于所述已知菌株和待測菌株消解的具體步驟為：將菌體移入聚四氟乙烯罐中，加入2.0ml硝酸，1.0ml過氧化氫，超純水2.0ml，混勻，浸泡30min，將聚四氟乙烯罐放入微波消解儀中，180℃消解20min。

6.根據(jù)權利要求3所述的一種篩檢細菌的方法，其特征在于：所述常見無機元素包括Na、K、Mg、Al、Ca、Fe、Zn、B、Mn、Cu、As、Se、Mo、Cd、Ba、Pb、Th、U、Be、V、Cr、Co、Ni、Ag、Sn、Sb、Hg、Tl。

7.一種采用特征元素篩檢六種致病菌的方法，其特征在于：采用特征元素篩檢金黃色葡萄球菌、鼠傷寒沙門氏菌、福氏志賀氏菌、大腸桿菌、副溶血弧菌和蠟樣芽孢桿菌的方法。

8.根據(jù)權利要求7所述的采用特征元素篩檢六種致病菌的方法，其特征在于具體方法為：將金黃色葡萄球菌、鼠傷寒沙門氏菌、福氏志賀氏菌、大腸桿菌、副溶血弧菌和蠟樣芽孢桿菌接種培養(yǎng)后，再將細菌消解、定容，通過電感耦合等離子體質譜儀檢測細菌中28種無機元素的含量，即Na、K、Mg、Al、Ca、Fe、Zn、B、Mn、Cu、As、Se、Mo、Cd、Ba、Pb、Th、U、Be、V、Cr、Co、Ni、Ag、Sn、Sb、Hg和Tl，然后對六種細菌中所述無機元素的含量進行對比區(qū)分，其中含量明顯區(qū)別于其他菌的元素選為特征元素，最后將待測細菌進行接種培養(yǎng)后再將細菌消解、定容，并通過電感耦合等離子體質譜儀檢測待測細菌中特征元素的含量進行細菌的篩查和鑒別。

9.根據(jù)權利要求8所述的采用特征元素篩檢六種致病菌的方法，其特征在于所述已知菌株和待測菌株的接種培養(yǎng)具體步驟為：將菌株的雌株接種于營養(yǎng)肉湯中，37℃震蕩培養(yǎng)24h，12000r/min離心3min，棄去上清液，用超純水反復洗滌三次后，將菌殘渣放置于-70℃過夜，然后將其置于冷凍離心機中-40℃，抽取36h備用。

10.根據(jù)權利要求8所述的采用特征元素篩檢六種致病菌的方法，其特征在于所述已知菌株和待測菌株消解的具體步驟為：將菌體移入聚四氟乙烯罐中，加入2.0ml硝酸，1.0ml過氧化氫，超純水2.0ml，混勻，浸泡30min，將聚四氟乙烯罐放入微波消解儀中，180℃消解20min。