[發明專利]衍生檢測甾體化合物A環雙鍵異構體的高效液相色譜方法

有效

• 申請號: 201710363918.6
• 申請日: 2017-05-22
• 公開（公告）號: CN106990186B
• 公開（公告）日: 2019-05-21
• 發明（設計）人: 李敏;馬歡;歐世榮
• 申請（專利權）人: 成都欣捷高新技術開發股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 成都九鼎天元知識產權代理有限公司 51214
• 代理人: 陶海燕;房云

1.一種衍生檢測甾體化合物A環雙鍵異構體的高效液相色譜方法，所述甾體化合物A環雙鍵異構體的結構如式I和式II所示，其中，R₁、R₂分別獨立地選自C_1-20的烷基，R₃選自H、Ac、Tf、Bz、Ms、Ts或C_1-20的烷基，該方法包括：將樣品溶解并加入衍生劑，所述衍生劑為間氯過氧苯甲酸或N-溴代丁二酰亞胺，反應結束后揮干溶劑，將反應產物用高效液相色譜進行檢測，所述高效液相色譜的色譜條件為：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱；采用水-非質子有機溶劑為流動相進行等度洗脫，所述非質子有機溶劑選自乙腈、四氫呋喃或丙酮；

2.根據權利要求1所述的衍生檢測甾體化合物A環雙鍵異構體的高效液相色譜方法，其特征在于，所述衍生劑為間氯過氧苯甲酸。

3.根據權利要求1所述的衍生檢測甾體化合物A環雙鍵異構體的高效液相色譜方法，其特征在于，R₁、R₂分別獨立地選自C_1-10的烷基，R₃選自H或C_1-10的烷基。

4.根據權利要求1所述的衍生檢測甾體化合物A環雙鍵異構體的高效液相色譜方法，其特征在于，R₁、R₂分別獨立地選自C_1-3的烷基，R₃為H或C_1-3的烷基。

5.根據權利要求1所述的衍生檢測甾體化合物A環雙鍵異構體的高效液相色譜方法，其特征在于，R₁、R₂為甲基，R₃為H。

6.根據權利要求1～5任意一項所述的衍生檢測甾體化合物A環雙鍵異構體的高效液相色譜方法，其特征在于，用水、非質子溶劑或者其組合溶解樣品，加入衍生劑后室溫下反應0.5-3h，然后揮干溶劑，用流動相溶解揮干的樣品反應產物，取樣10ul用高效液相色譜法進行檢測。

7.根據權利要求6所述的衍生檢測甾體化合物A環雙鍵異構體的高效液相色譜方法，其特征在于，所述非質子溶劑為乙腈、乙酸乙酯、四氫呋喃、二氯甲烷、二氧六環、丙酮、二甲基甲酰胺和二甲基亞砜中的一種或其組合。

8.根據權利要求6所述的衍生檢測甾體化合物A環雙鍵異構體的高效液相色譜方法，其特征在于，所述非質子溶劑為二氯甲烷或二氧六環。

9.根據權利要求1所述的衍生檢測甾體化合物A環雙鍵異構體的高效液相色譜方法，其特征在于，所述樣品與衍生劑的摩爾比為1：(1～1.5)。

10.根據權利要求1所述的衍生檢測甾體化合物A環雙鍵異構體的高效液相色譜方法，其特征在于，所述樣品與衍生劑的摩爾比為1：1。

11.根據權利要求1所述的衍生檢測甾體化合物A環雙鍵異構體的高效液相色譜方法，其特征在于，所述非質子有機溶劑為乙腈。

12.根據權利要求1所述的衍生檢測甾體化合物A環雙鍵異構體的高效液相色譜方法，其特征在于，所述流動相水-非質子有機溶劑的體積比為(40-60):(60-40)。

13.根據權利要求1所述的衍生檢測甾體化合物A環雙鍵異構體的高效液相色譜方法，其特征在于，所述流動相水-非質子有機溶劑的體積比為55:45。

14.根據權利要求1所述的衍生檢測甾體化合物A環雙鍵異構體的高效液相色譜方法，其特征在于，所述等度洗脫的流速為1～2mL.min^-1。