[發明專利]一種用于檢測德爾卑沙門氏菌的靶基因、特異性引物對及檢測方法和試劑盒有效
| 申請號： | 201710354984.7 | 申請日： | 2017-05-19 |
| 公開（公告）號： | CN107164472B | 公開（公告）日： | 2020-11-17 |
| 發明（設計）人： | 翟立公;王俊穎;王蓓蓓;王麗;郭元新;楊劍婷;杜傳來 | 申請（專利權）人： | 安徽科技學院 |
| 主分類號： | C12Q1/689 | 分類號： | C12Q1/689;C12Q1/10;C12N15/11;C12R1/42 |
| 代理公司： | 合肥匯融專利代理有限公司 34141 | 代理人： | 張雁 |
| 地址： | 233100 *** | 國省代碼： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 檢測 德爾卑 沙門氏菌 基因 特異性 引物 方法 試劑盒 | ||
1.一種檢測德爾卑沙門氏菌的方法，其特征在于，包括以下步驟：
S1、提取樣品DNA，采用特異性引物對SD1、SD2、SD3、SD11、SD12，分別進行PCR擴增，所述樣品來自食品，其中
SD1-f：核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示，SD1-r：核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；
SD2-f：核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示，SD2-r：核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示；
SD3-f：核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示，SD3-r：核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示；
SD11-f：核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示，SD11-r：核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示；
SD12-f：核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示，SD12-r：核苷酸序列如SEQ ID NO.15所示；
S2、凝膠電泳檢測擴增產物；
S3、比較電泳后條帶，若在171bp、164bp、512bp、608bp和296bp位置有條帶，則樣品中含有德爾卑沙門氏菌。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述PCR擴增過程中，25μlPCR反應體系包含有2×Master 12.5μl，10μM引物對1μl，模板取1-5μl，補ddH2O至25μl。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述凝膠電泳采用瓊脂糖凝膠電泳。
4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：以25μlPCR反應體系計量，對于權利要求1所述的SD1、SD2、SD3、SD11和SD12引物，需要德爾卑沙門氏菌總DNA濃度≥2.685ng/μl。
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