[發明專利]一種二乙醇胺脫氫產物中甘氨酸與亞氨基二乙酸的液相色譜定量分析方法

有效

• 申請號: 201710353154.2
• 申請日: 2017-05-18
• 公開（公告）號: CN107091891B
• 公開（公告）日: 2019-07-30
• 發明（設計）人: 段正康;張蕾;朱宏文;尹科
• 申請（專利權）人: 湘潭大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246
• 代理人: 張宇江

1.一種二乙醇胺脫氫產物中甘氨酸與亞氨基二乙酸的液相色譜定量分析方法，其特征在于：

液相色譜條件：

(1)色譜柱：Agilent ZORBAX SAX色譜柱；

(2)流動相：A組分：濃度為0.02～0.04mol/L的磷酸氫二鉀溶液，其pH值為2.0～3.0；B組分：濃度為100％的甲醇；

(3)流動相濃度梯度：時間/min0～15，A組分流動相體積分數/％100～90，B組分流動相體積分數/％0～10

(4)流動相流速梯度：時間/min0～15，流速/ml.min^-10.3～1.6；

(5)檢測波長：200～210nm；

(6)柱溫：36～40℃；

標準溶液、樣品溶液的配制和定量分析方法：

(1)標準溶液的配制：分別準確稱取甘氨酸和亞氨基二乙酸標準樣品，用超純水配成濃度為0.045～0.300g/L和濃度為0.010～0.150mg/L的甘氨酸和亞氨基二乙酸系列濃度標準樣品；

(2)標準曲線的繪制：在上述液相色譜條件下，分別對甘氨酸和亞氨基二乙酸系列標準樣品進行檢測，以峰面積對標準樣品濃度作圖，得到甘氨酸和亞氨基二乙酸標準樣品標準曲線；

(3)甘氨酸和亞氨基二乙酸的回歸方程分別為：

N_Gly(A)＝1573.4C_Gly+1.894，R＝0.99991；

N_IDA(A)＝972.0812C_IDA-8.87896，R＝0.99993；

(4)二乙醇胺脫氫產物樣品的配制與測定：

取二乙醇胺脫氫產物，用超純水稀釋至0.01～0.03％濃度，用超聲波震蕩混合均勻，并用磷酸溶液調節pH值至2.0～4.0，超純水定容，用超聲波震蕩混合并脫氣，配制成二乙醇胺脫氫產物樣品；在上述液相色譜條件下，對二乙醇胺脫氫產物樣品進行檢測，連續進樣五次，得到二乙醇胺脫氫產物的分析圖譜；根據圖譜所測出的甘氨酸和亞氨基二乙酸的峰面積，代入甘氨酸和亞氨基二乙酸的回歸方程，計算得到二乙醇胺脫氫產物樣品中甘氨酸和亞氨基二乙酸的含量；

(5)二乙醇胺脫氫產物樣品中甘氨酸和亞氨基二乙酸的含量計算公式：

C_Gly＝n×(N_Gly(A)-1.894)/1573.4

C_IDA＝n×(N_IDA(A)+8.87896)/972.0812

式中，C_Gly為每升二乙醇胺脫氫產物中甘氨酸的克數(g/L)，C_IDA為每升二乙醇胺脫氫產物中亞氨基二乙酸的克數(g/L)，n為二乙醇胺脫氫產物稀釋的倍數，N_Gly(A)為二乙醇胺脫氫產物中甘氨酸的峰面積和N_IDA(A)為二乙醇胺脫氫產物中亞氨基二乙酸的峰面積。