[發明專利]一種篩選中藥神經活性成分的細胞膜固相色譜法及其應用

有效

• 申請號: 201710347152.2
• 申請日: 2017-05-16
• 公開（公告）號: CN106990200B
• 公開（公告）日: 2018-12-14
• 發明（設計）人: 聶紅;潘儉豪;徐曉云;湯丹;張喆
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 裘暉;陳燕嫻

1.一種篩選中藥神經活性成分的細胞膜固相色譜法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)通過高效液相色譜(HPLC)聯用質譜建立待篩選中藥苦參甲醇提取液指紋圖譜；

(2)分離與培養小鼠背根神經節細胞；

(3)小鼠背根神經節細胞膜固相化篩選苦參水提取液中的效應成分；

(4)洗脫未結合成分，棄去洗脫液；

(5)解離得到活性成分解離液；

(6)將步驟(5)得到的活性成分解離液進行HPLC分析，通過比較活性成分解離液和步驟(1)得到的苦參甲醇提取液指紋圖譜中各吸收峰，確定與小鼠背根神經節細胞特異結合成分的特征峰，得到活性成分的特征峰，從而篩選得到中藥神經活性成分；

所述步驟(1)與步驟(6)中的HPLC的分析條件為：有機相為乙腈；水相為0.1％氨水；梯度洗脫0～30min，有機相：10～46％；30～40min，有機相：46～90％；40～41min，有機相：90～10％；41～50min，有機相：10％；以上均為體積百分比；進樣量：20μL；柱溫：25～35℃；檢測波長：220nm；流速：1mL/min；

所述的HPLC所用的色譜柱為可耐堿性條件的色譜柱。

2.根據權利要求1所述的篩選中藥神經活性成分的細胞膜固相色譜法，其特征在于：步驟(6)中所述的與小鼠背根神經節細胞特異結合成分的特征峰為1號峰、7號峰、8號峰、17號峰、19號峰5個特征峰，所述5個特征峰是與背根神經節細胞膜靶點結合的效應成分群。

3.根據權利要求2所述的篩選中藥神經活性成分的細胞膜固相色譜法，其特征在于：所述的1號峰物質為毛蕊異黃酮、7號峰為氧化苦參堿、8號峰為氧化槐果堿、17號峰為高麗槐素、19號峰為槐果堿。

4.權利要求1～3任一項所述的篩選中藥神經活性成分的細胞膜固相色譜法在中藥神經活性成分篩選中的應用。