[發(fā)明專利]一個(gè)早期評(píng)估食管癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的SNP及檢測(cè)試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710345378.9
• 申請(qǐng)日: 2017-05-09
• 公開（公告）號(hào): CN107236791B
• 公開（公告）日: 2020-09-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 白春英;蘇志勇;瑞云;史鐵偉;許麗艷;李恩民;賴青;金品辛;王亞奇;張佳樂(lè);孫斌;王治國(guó)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 赤峰學(xué)院
• 主分類號(hào): C12Q1/6886
• 分類號(hào): C12Q1/6886
• 代理公司: 北京慕達(dá)星云知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 李冉

1.一種針對(duì)5-脂氧合酶c.760G＞A位點(diǎn)設(shè)計(jì)的引物在制備檢測(cè)食管癌試劑盒中的應(yīng)用，其特征在于，試劑盒包括：針對(duì)5-脂氧合酶c.760G＞A位點(diǎn)設(shè)計(jì)的上游等位基因特異性引物2條、下游引物1條、一對(duì)內(nèi)參照引物、PCR mix和滅菌水；

所述引物序列如下：

檢測(cè)食管癌的方法具體包括：外周血經(jīng)細(xì)胞分離后，從白細(xì)胞中提取基因組DNA，將其濃度調(diào)至適合PCR擴(kuò)增的100ng/μl工作液，每個(gè)樣本做A和B兩管，A管中加入野生型上游特異性引物，B管中加入突變體上游特異性引物，引物濃度均為10μM；在反應(yīng)體系中先加入滅菌水5μl、PCR mix 10μl、一對(duì)內(nèi)參照引物各1μl、1條上游特異性引物和一條下游引物各1μl，模板DNA 1μl，總反應(yīng)體系為20μl；PCR擴(kuò)增后，用2％的瓊脂糖凝膠電泳30分鐘，然后EB染液中浸泡30分鐘，放射自顯影拍照，判斷是否有突變。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于使用試劑盒所檢測(cè)的標(biāo)本為人外周血。

3.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于：PCR反應(yīng)條件為95℃預(yù)變性5分鐘，然后按95℃30秒、56℃30秒、72℃1分鐘循環(huán)35次，末次循環(huán)后72℃延伸10分鐘，4℃保存。