[發明專利]具有ACE抑制功能的牦牛骨蛋白肽及制備方法和應用

有效

• 申請號: 201710345158.6
• 申請日: 2017-05-16
• 公開（公告）號: CN107082807B
• 公開（公告）日: 2020-06-12
• 發明（設計）人: 張恒;羅永康
• 申請（專利權）人: 安徽國肽生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/78
• 分類號: C07K14/78;C12P21/06;A23L33/18;A61K38/39;A61P9/12
• 代理公司: 北京金言誠信知識產權代理有限公司 11229
• 代理人: 劉寶榮

本發明提供了一種具有ACE抑制功能的牦牛骨蛋白肽及制備方法和應用。所述牦牛骨蛋白肽為牦牛骨蛋白經過復合蛋白酶分步酶解的酶解物制得；所述復合蛋白酶為堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和風味蛋白酶。本發明所述的牦牛骨蛋白肽具有優異的ACE抑制功能，ACE抑制活性(IC50值)小于0.32mg/mL，可以作為ACE抑制劑應用于特需食品和營養食品中。本發明的牦牛骨蛋白肽制備方法簡單，整個加工過程中沒有添加酸或堿進行pH的調整，產品保持較好的功能特性，較易實現產業化生產。

技術領域

本發明涉及動物食品加工領域，更具體地，涉及一種具有ACE抑制功能的牦牛骨蛋白肽及制備方法和應用。

背景技術

高血壓是對人類健康危害極大的一種疾病，潛伏期長。高血壓的早期階段，一般沒有明顯不適癥，直至發生臨床跡象心臟病發作、腦血管破裂而導致死亡。

血管緊張素轉化酶(Angiotensin I converting enzyme，ACE)為腎素-血管緊張素系統的關鍵酶。血管緊張素原在腎素的作用下轉化為血管緊張素I，血管緊張素I在ACE的作用下轉化為血管緊張素II，刺激血管收縮，造成血壓上升。抑制ACE的活性對降低血壓有著積極的作用，因而開發有效的ACE抑制劑引起人們的極大關注。雖然來源于食物的ACE抑制肽比人工合成的ACE抑制劑作用弱，但是它有其獨特的優點，不會產生降壓過度的問題，安全性高，無副作用，除降壓功能外，往往同時具有免疫促進、易消化吸收等功能。由于藥物療法存在副作用，天然食物中的降血壓功能因子的開發利用將成為今后高血壓非藥物治療的重要部分。

現有技術中有利用魚類資源或蛤類制備ACE抑制肽的方法，如中國專利CN106399435A公開了一種利用魚鱗制備ACE抑制肽的方法，該方法包括將魚鱗水洗去雜質后，用NaCl溶液浸泡1-2天，脫除雜蛋白和魚銀粉，將魚鱗撈出后再用HCl溶液、料液比1:10-1:20，浸泡1-2h，以脫除鈣鹽等無機鹽；將魚鱗用蒸餾水浸泡溶脹，接著用堿性蛋白酶酶解，然后離心，上清液為酶解液，將酶解液冷凍干燥得到ACE抑制肽；所得到的產品ACE抑制率較高，與化學合成的ACE抑制肽相比，制備的ACE抑制肽安全無毒、易于消化；如中國專利CN104593466A公開了一種利用內源酶制備藍蛤蛋白源ACE抑制肽的方法，該方法利用藍蛤體內的內源性蛋白酶進行酶解，通過自溶獲得天然ACE抑制肽，制備過程中不加入任何外源蛋白酶，整個制備過程包括新鮮藍蛤預處理、勻漿、內源酶激活、酶爭、滅酶、脫腥、離心、冷凍干燥；也有報道采用羅非魚魚皮及植物蛋白為原料生產ACE抑制肽，如中國專利CN101240312A公開了一種源于魚皮的ACE抑制肽的制備方法，該方法實現羅非魚廢棄物的綜合利用，具體以羅非魚魚皮為原料，水提羅非魚魚皮中的魚皮蛋白，采用蛋白酶進行水解，經滅酶、脫苦、脫色、脫味、過濾、離子交換和濃縮等工序得到魚皮蛋白酶解液(TSP-1)，將TSP-1超濾處理后，再經凝膠層收集高活性組分，冷凍干燥制得高活性的ACE抑制肽產品；中國專利CN104131055A公開了一種藻紅蛋白ACE抑制肽的制備方法，該方法包括藻紅蛋白的提取步驟，加入胃蛋白酶酶解再加入胰蛋白酶酶解；將酶解后的凍干粉溶于純水，上樣于SephadexG-15凝膠柱，收集活性最高峰為藻紅蛋白ACE抑制組分。將所述組分繼續上樣于高效液相色譜ZORBAX300SB-C18柱進行分離，以檢測該組分中藻紅蛋白ACE抑制肽制備，該發明的方法可以避免活性肽經人體攝入后被胃腸道消化液降解而失活，同時縮減了成本。

但這些制備方法中通常采用通過添加酸、堿調節pH,影響產品的品質，同時對蛋白肽的主要組成不明確。我國牦牛骨資源豐富，目前國內外專利中未見利用牦牛骨蛋白資源制備血管緊張素轉化酶抑制肽的專利文獻報道。

發明內容

為了解決現有技術中存在的問題，本發明的目的是提供一種具有ACE抑制功能的牦牛骨蛋白肽及其制備方法和應用。

為了實現本發明的目的，本發明一方面提供了一種具有ACE抑制功能的牦牛骨蛋白肽，該牦牛骨蛋白肽為牦牛骨蛋白經過復合蛋白酶分步酶解的酶解物制得；其中，復合蛋白酶為堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和風味蛋白酶。