[發明專利]新的賴氨酸脫羧酶突變體及其應用

有效

• 申請號: 201710344705.9
• 申請日: 2017-05-16
• 公開（公告）號: CN107164352B
• 公開（公告）日: 2020-11-13
• 發明（設計）人: 孫際賓;趙晶;劉嬌;孫村民;鄭平;馬延和
• 申請（專利權）人: 中國科學院天津工業生物技術研究所
• 主分類號: C12N9/88
• 分類號: C12N9/88;C12P13/00;C12N15/63
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 崔佳佳;陸鳳

1.一種賴氨酸脫羧酶，所述賴氨酸脫羧酶是：

(a)其氨基酸序列由SEQ ID NO:1所示序列突變而來，在以下氨基酸殘基位點發生突變：

176位的氨基酸殘基突變為Val；或者

176位的氨基酸殘基突變為Val和88位的氨基酸殘基突變為Ser；或者

176位的氨基酸殘基突變為Val和230位的氨基酸殘基突變為His；或者

176位的氨基酸殘基突變為Val、230位的氨基酸殘基突變為His和9位的氨基酸殘基突變為Arg；或者

176位的氨基酸殘基突變為Val、230位的氨基酸殘基突變為His和111位的氨基酸殘基突變為Gly；或者

176位的氨基酸殘基突變為Val、230位的氨基酸殘基突變為His和44位的氨基酸殘基突變為Arg；

或

(b)所述賴氨酸脫羧酶由在(a)所述的氨基酸序列的C末端添加6個His氨基酸殘基而形成，并且具有(a)所述賴氨酸脫羧酶的功能。

2.一種表達載體，所述表達載體包含權利要求1所述的賴氨酸脫羧酶的編碼序列。

3.一種宿主細胞，所述宿主細胞包含權利要求2所述的表達載體或者其基因組中整合有權利要求1所述的賴氨酸脫羧酶的編碼序列。

4.如權利要求3所述的宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞是細菌。

5.如權利要求4所述的宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞是大腸桿菌(E.coli)、谷氨酸棒桿菌(Corynebacterium glutamicum)、蜂房哈夫尼菌(Hafnia alvei)或枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)。

6.如權利要求5所述的宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞是大腸桿菌(E.coli)。

7.一種生產1,5-戊二胺的方法，所述方法包括：

(1)利用權利要求1所述的賴氨酸脫羧酶或者權利要求3-6中任一項所述的宿主細胞生產1,5-戊二胺；和

(2)從(1)的體系中分離得到1,5-戊二胺。

8.權利要求1所述的賴氨酸脫羧酶或者權利要求2所述的表達載體或者權利要求3-6中任一項所述的宿主細胞在生產1,5-戊二胺中的應用。