[發明專利]一種卷煙主流煙氣中煙堿旋光異構體的正相液相色譜-串聯質譜檢測方法

有效

• 申請號: 201710340176.5
• 申請日: 2017-05-15
• 公開（公告）號: CN107132289B
• 公開（公告）日: 2019-09-24
• 發明（設計）人: 余晶晶;蔡君蘭;王冰;秦亞瓊;劉克建;趙曉東;薛聰;劉紹鋒;張曉兵
• 申請（專利權）人: 中國煙草總公司鄭州煙草研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 鄭州中民專利代理有限公司 41110
• 代理人: 姜振東

一種卷煙主流煙氣中煙堿旋光異構體的正相液相色譜?串聯質譜檢測方法，用劍橋濾片捕集煙氣總粒相物，用NaOH溶液?正己烷提取煙堿，采用手性色譜柱?正相色譜法實現煙堿旋光異構體的分離，柱后高壓輸液泵引入異丙醇并進行分流后結合串聯質譜進行分析。有益效果如下：1）首次采用正相液相色譜?串聯質譜法分析卷煙主流煙氣中煙堿旋光異構體；2）采用柱后高壓輸液泵引入異丙醇并分流，補償進入質譜的極性溶劑的量，同時減少非極性溶劑的量，提高了離子化效率，從而滿足了液相色譜串聯質譜分析的要求；3）與現有方法比較，本發明中S?(?)?煙堿和R?(+)?煙堿的色譜分離度高（保留時間相差1min）；分析時間短（僅需17min）。

技術領域

本發明屬于復雜樣品中手性異構體分離、分析檢測技術研究，具體涉及一種卷煙主流煙氣中煙堿旋光異構體的正相液相色譜-串聯質譜檢測方法，主要是劍橋濾片捕集卷煙主流煙氣總粒相物，用NaOH溶液-正己烷提取濾片上的煙堿，采用手性色譜柱分離煙堿旋光異構體，柱后高壓輸液泵引入異丙醇并進行分流，結合串聯質譜分析。

背景技術

煙堿是煙草和煙氣中含量最豐富的生物堿，是人類吸煙的主要動力。煙堿有兩個旋光異構體，即S-(-)-煙堿和R-(+)-煙堿。二者具有完全不同的代謝機理和生理特性，S-(-)-煙堿的生理活性和毒性比R-(+)-煙堿更強。因此，煙堿旋光異構體的分離分析在藥學和吸煙與健康方面具有重要意義。天然煙草中的煙堿主要是S-(-)-煙堿，而R-(+)-煙堿僅占煙堿總量的0.2~0.3%。卷煙煙氣中R-(+)-煙堿比煙草中略高，占煙堿總量的3.0%左右。

目前文獻報道煙堿旋光異構體的分析方法主要是手性色譜柱-二維氣相色譜法、手性色譜柱-液相色譜法等。手性色譜柱-二維氣相色譜法存在的問題分析時間長；而手性色譜柱-液相色譜法存在的問題是靈敏度較低，對含量較低的R-(+)-煙堿難以實現準確定量。

發明內容

本發明的目的是針對以上問題，提出了一種正相液相色譜-串聯質譜法分析卷煙主流煙氣中煙堿旋光異構體。采用手性色譜柱-正相液相色譜法實現了煙堿旋光異構體的分離；為滿足串聯質譜分析的要求，采用高壓輸液泵柱后引入異丙醇并進行分流，有利于離子化效率及方法靈敏度的提高，從而實現卷煙煙氣中煙堿旋光異構體的測定。

本發明的目的是通過以下技術方案來實現的：

一種卷煙主流煙氣中煙堿旋光異構體的正相液相色譜-串聯質譜檢測方法，是采用劍橋濾片捕集卷煙主流煙氣總粒相物，用NaOH溶液-正己烷提取濾片上的煙堿，通過手性色譜柱分離煙堿旋光異構體，柱后高壓輸液泵引入異丙醇并進行分流，結合串聯質譜進行分析測定，具體步驟如下：

a、卷煙主流煙氣粒相物中煙堿的捕集及萃取：

采用劍橋濾片捕集卷煙主流煙氣總粒相物，將濾片置于具塞錐形瓶中，加入1~5mL 5.0%NaOH溶液，靜置5~30 min，準確加入含有內標的正己烷溶液10~50 mL，超聲萃取5~30 min，取上層清液過有機相濾膜，有機相濾膜上加有1~3.0 g無水硫酸鈉，凈化后的樣品溶液進正相液相色譜-串聯質譜分析。

b、樣品的分析：

液相色譜條件：采用正相液相色譜-串聯質譜分析，所用色譜柱為手性色譜柱；柱溫：30 ^oC；流動相A：含有堿性添加劑的正己烷，流動相B：異丙醇；等度洗脫；流速0.5~1.0mL/min；進樣體積10 μL，分析時間為17min。

柱后加入異丙醇及分流：為提高正相液相色譜-串聯質譜法的靈敏度，實現煙堿旋光異構體定量分析的要求，在柱后通過三通閥連接，采用安捷倫高壓輸液泵引入異丙醇，控制異丙醇流速。同時，為適應質譜分析的要求，進行柱后分流以減少進入質譜的溶劑量。采用離子源上配置的三通閥進行柱后分流，通過控制PEEK管的長度，控制分流比。