[發(fā)明專利]一種卷煙主流煙氣中煙堿旋光異構(gòu)體的正相液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710340176.5
• 申請日: 2017-05-15
• 公開（公告）號: CN107132289B
• 公開（公告）日: 2019-09-24
• 發(fā)明（設計）人: 余晶晶;蔡君蘭;王冰;秦亞瓊;劉克建;趙曉東;薛聰;劉紹鋒;張曉兵
• 申請（專利權(quán)）人: 中國煙草總公司鄭州煙草研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 鄭州中民專利代理有限公司 41110
• 代理人: 姜振東

1.一種卷煙主流煙氣中煙堿旋光異構(gòu)體的正相液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法，其特征在于：是采用劍橋濾片捕集卷煙主流煙氣總粒相物，用NaOH溶液-正己烷提取濾片上的煙堿，通過手性色譜柱分離煙堿旋光異構(gòu)體，柱后高壓輸液泵引入異丙醇并進行分流，結(jié)合串聯(lián)質(zhì)譜進行分析測定，具體步驟如下：

a、卷煙主流煙氣粒相物中煙堿的捕集及萃取：

采用劍橋濾片捕集卷煙主流煙氣總粒相物，將濾片置于具塞錐形瓶中，加入1~5 mL5.0%NaOH溶液，靜置5~30 min，準確加入含有內(nèi)標的正己烷溶液10~50 mL，超聲萃取5~30min，取上層清液過有機相濾膜，有機相濾膜上加有1~3.0 g無水硫酸鈉，凈化后的樣品溶液進正相液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析；

b、樣品的分析：

液相色譜條件：采用正相液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析，所用色譜柱為大賽璐手性色譜柱CHIRALPAK^? IC，規(guī)格為4.6 mm×250 mm，i.d. 5 μm；柱溫：30 ^oC；流動相A：含有堿性添加劑的正己烷，流動相B：異丙醇；等度洗脫，條件為A: B = 95：5；流速0.5~1.0 mL/min；進樣體積10 μL，分析時間為17min；所述堿性添加劑為二乙胺，添加量為正己烷質(zhì)量的0.02%~0.2%；

柱后加入異丙醇及分流：為提高正相液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法的靈敏度，實現(xiàn)煙堿旋光異構(gòu)體定量分析的要求，在柱后通過三通閥連接，采用安捷倫高壓輸液泵引入異丙醇，控制異丙醇流速為0.1~1.0 mL/min，同時，為適應質(zhì)譜分析的要求，進行柱后分流以減少進入質(zhì)譜的溶劑量；采用離子源上配置的三通閥進行柱后分流，通過控制PEEK管的長度，控制分流比為1:3~1:5；

離子源：電噴霧電離源（ESI）；掃描方式：正離子掃描；檢測方式：多反應監(jiān)測MRM；電噴霧電壓：5000 V；氣簾氣壓力：30 psi；輔助氣1壓力：70 psi；輔助氣2壓力：70 psi；離子源溫度：550 ^oC；各化合物及內(nèi)標的保留時間、母離子、子離子、碰撞能量（CE）及去簇電壓（DP）參見表1：

表1：煙堿及內(nèi)標的保留時間、母離子、子離子、碰撞能量及去簇電壓

分析物	保留時間-min	Q1 -amu	Q3 -amu	CE -eV	DP-V
S-(-)-煙堿	14.39	163.0	132.0	25	80
R-(+)-煙堿	15.52	163.0	132.0	25	80
3-煙堿外消旋體]]>	14.39/15.52	166.0	132.0	26	80

。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于：步驟a中，采用外消旋的d₃-煙堿為內(nèi)標，d₃-S-(-)-煙堿和d₃-R-(+)-煙堿合并計算，濃度范圍為1~10 mg/mL。