[發明專利]柑橘黃化脈明病毒免疫膠體金試紙條及其制備方法

在審

• 申請號: 201710333029.5
• 申請日: 2017-05-12
• 公開（公告）號: CN107014999A
• 公開（公告）日: 2017-08-04
• 發明（設計）人: 周常勇;賓羽;宋震;李中安
• 申請（專利權）人: 西南大學
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/569;G01N33/558
• 代理公司: 重慶市前沿專利事務所(普通合伙)50211
• 代理人: 鄒曉艷

1.一種柑橘黃化脈明病毒免疫膠體金試紙條，包括：樣品墊、金標墊、硝酸纖維素膜、吸水墊和支持板；其特征在于：所述金標墊是結合有膠體金標記的柑橘黃化脈明病毒鼠源單克隆抗體1E1的玻璃纖維素膜；硝酸纖維素膜上的檢測線位置包被柑橘黃化脈明病毒鼠源單克隆抗體1E1，硝酸纖維素膜上的質控線位置包被羊抗鼠IgG。

2.一種如權利要求1所述的柑橘黃化脈明病毒免疫膠體金試紙條的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)制備膠體金；

(2)制備金標抗體：利用膠體金和柑橘黃化脈明病毒鼠源單克隆抗體1E1制備得到膠體金標記抗體1E1復合物；

(3)將上述制備得到的膠體金標記抗體1E1復合物噴鋪于玻璃纖維素膜上，室溫干燥，即得金標墊；

(4)制備包被的硝酸纖維素膜：吸取柑橘黃化脈明病毒鼠源單克隆抗體1E1在硝酸纖維素膜上噴畫成為檢測線；吸取羊抗鼠IgG在硝酸纖維素膜上噴畫成為質控線，室溫干燥備用；

(5)將樣品墊、金標墊、噴畫有檢測線和質控線的硝酸纖維素膜、吸水墊依次粘貼在支持板上，即得到柑橘黃化脈明病毒免疫膠體金試紙條。

3.如權利要求2所述的柑橘黃化脈明病毒免疫膠體金試紙條的制備方法，其特征在于：步驟(1)中的膠體金為直徑30nm的膠體金。

4.如權利要求2所述的柑橘黃化脈明病毒免疫膠體金試紙條的制備方法，其特征在于：步驟(3)中金標墊的具體制備方法為將抗體終濃度60μg/mL的金標抗體1E1復合物以6～7μL/cm²均勻地噴鋪于玻璃纖維素膜上。

5.如權利要求2所述的柑橘黃化脈明病毒免疫膠體金試紙條的制備方法，其特征在于：步驟(4)中制備包被的硝酸纖維素膜的具體方法為吸取2.5mg/mL的單克隆抗體1E1以0.5μL/cm²噴畫1mm寬的檢測線；吸取0.85mg/mL的羊抗鼠IgG以0.5μL/cm²噴畫1mm寬的質控線。

6.如權利要求2所述的柑橘黃化脈明病毒免疫膠體金試紙條的制備方法，其特征在于：所述金標墊距檢測線6mm，檢測線距質控線5mm。

7.如權利要求2所述的柑橘黃化脈明病毒免疫膠體金試紙條的制備方法，其特征在于：所述樣品墊為聚酯膜Fusion 3。

8.如權利要求2所述的柑橘黃化脈明病毒免疫膠體金試紙條的制備方法，其特征在于：所述支持板為PVC板。

9.如權利要求2所述的柑橘黃化脈明病毒免疫膠體金試紙條的制備方法，其特征在于：將樣品墊、金標墊、噴畫有檢測線和質控線的硝酸纖維素膜、吸水墊依次粘貼在支持板上時，具體方法為將樣品墊置于硝酸纖維素膜上與其重疊2mm，將金標墊插入樣品墊與硝酸纖維素膜的重合處。