[發(fā)明專利]藍(lán)莓組織培養(yǎng)的再生培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710332415.2
• 申請(qǐng)日: 2017-05-11
• 公開（公告）號(hào): CN106982737B
• 公開（公告）日: 2020-01-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱友銀;宗宇;李永強(qiáng);陳文榮;郭衛(wèi)東;劉向蕾;梅淑芳;應(yīng)炎標(biāo)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 金華職業(yè)技術(shù)學(xué)院;浙江師范大學(xué)
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 11371 北京超凡志成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)
• 代理人: 吳開磊

本發(fā)明屬于植物的組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種藍(lán)莓組織培養(yǎng)的再生培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法和應(yīng)用。本發(fā)明提供的藍(lán)莓組織培養(yǎng)的再生培養(yǎng)基，包括初代培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和葉片不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基；初代培養(yǎng)基包括改良WPM培養(yǎng)基、6－BA、蔗糖和植物凝膠，pH為5.2～5.4；增殖培養(yǎng)基包括改良WPM培養(yǎng)基、ZT、蔗糖和植物凝膠，pH為5.2～5.4；葉片不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基包括改良WPM培養(yǎng)基、TDZ、蔗糖和植物凝膠，pH為5.2～5.4；其中，改良WPM培養(yǎng)基，是將WPM培養(yǎng)基中的CaCl₂·2H₂O替換為糖醇鈣。本發(fā)明具有針對(duì)性強(qiáng)、適應(yīng)性好，成本低廉的優(yōu)點(diǎn)，能夠有效提高愈傷組織的誘導(dǎo)率和不定芽的分化率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物的組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種藍(lán)莓組織培養(yǎng)的再生培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

藍(lán)莓為杜鵑花科越橘屬植物，是具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和廣闊開發(fā)前景的新興果樹樹種。藍(lán)莓果實(shí)營(yíng)養(yǎng)豐富，既可鮮食，也可深加工，低能量且含有多種抗氧化成分，尤其是其抗氧化能力為所有果品蔬菜之首。藍(lán)莓果實(shí)不僅具有增強(qiáng)人體免疫力、防癌抗癌的奇特功效、并可以顯著降低心血管疾病、糖尿病、帕金森病等的發(fā)病率；因此，藍(lán)莓被譽(yù)為“黃金漿果”，是聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織(FAO)重點(diǎn)推薦的人類五大健康食品之一。

我國(guó)藍(lán)莓種植和研究較晚，從20世紀(jì)80年代才開始引進(jìn)種植，但近幾年發(fā)展呈迅猛態(tài)勢(shì)。隨著近來市場(chǎng)對(duì)藍(lán)莓的需求量不斷增長(zhǎng)，傳統(tǒng)的扦插、壓條等繁殖方法繁殖系數(shù)和出苗率低，生根難，繁殖規(guī)模受限等缺點(diǎn)，難以滿足迅速推廣優(yōu)良品種的需要。采用組織培養(yǎng)方法可以在短期內(nèi)快速繁殖種苗，不僅繁殖率高，而且可以保持原繁殖母株的優(yōu)良性狀，生產(chǎn)出的苗木質(zhì)量好，均勻一致，容易脫去病毒，為后期樹體生長(zhǎng)結(jié)果奠定良好的基礎(chǔ)，組織培養(yǎng)技術(shù)近來來在生產(chǎn)上應(yīng)用越來越廣泛。

在藍(lán)莓組織培養(yǎng)中再生培養(yǎng)基的配方以及外源植株激素的加入至關(guān)重要。目前所公開的培養(yǎng)基的配方都是針對(duì)不同的品種而言的，并不是一種培養(yǎng)基配方就適合所有的藍(lán)莓初代培養(yǎng)或再生培養(yǎng)。由于藍(lán)莓品種差異對(duì)培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分需求略有不同，因此通過組織培養(yǎng)方式生產(chǎn)藍(lán)莓種苗時(shí)，需依據(jù)品種使用不同的培養(yǎng)基。同時(shí)，外源植物激素作為生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)離體外植體的分化存在明顯促進(jìn)作用，不同的植物激素種類及濃度對(duì)于離體外植體細(xì)胞的分化和不同器官發(fā)生起著不同的作用。

目前，對(duì)于藍(lán)莓外植體的再生技術(shù)尤其是藍(lán)莓葉片離體再生技術(shù)的研究并不多，而且還存在著諸多問題。為進(jìn)一步改良藍(lán)莓品質(zhì)，建立穩(wěn)定的、高效的葉片離體再生體系是進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化的重要基礎(chǔ)的前提，有助于對(duì)藍(lán)莓進(jìn)行遺傳改良。因此，研究出適宜的藍(lán)莓外植體再生技術(shù)中激素種類、濃度配比、再生培養(yǎng)基以及培養(yǎng)條件具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一目的在于提供一種藍(lán)莓組織培養(yǎng)的再生培養(yǎng)基，具有針對(duì)性強(qiáng)、適應(yīng)性好，成本低廉的優(yōu)點(diǎn)，能夠有效提高愈傷組織的誘導(dǎo)率和不定芽的分化率。

本發(fā)明的第二目的在于提供一種藍(lán)莓葉片離體再生的培養(yǎng)方法，該方法通過使用上述的藍(lán)莓組織培養(yǎng)的再生培養(yǎng)基進(jìn)行藍(lán)莓葉片離體再生的培養(yǎng)，具有操作簡(jiǎn)便，成本低，誘導(dǎo)效率高，周期短的優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明的第三目的在于提供一種上述的藍(lán)莓組織培養(yǎng)的再生培養(yǎng)基在培養(yǎng)藍(lán)莓布里吉塔方面的應(yīng)用。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：

根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，本發(fā)明提供一種藍(lán)莓組織培養(yǎng)的再生培養(yǎng)基，包括初代培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和葉片不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基；

所述初代培養(yǎng)基包含：改良WPM培養(yǎng)基+0.5～2mg/L 6－BA+15～40g/L蔗糖+5～15g/L植物凝膠，pH為5.2～5.4；

所述增殖培養(yǎng)基包含：改良WPM培養(yǎng)基+0.5～2mg/L ZT+15～40g/L蔗糖+5～15g/L植物凝膠，pH為5.2～5.4；