[發明專利]一種誘導厚葉巖白菜體細胞胚胎的方法在審
| 申請號: | 201710328848.0 | 申請日: | 2017-05-11 |
| 公開(公告)號: | CN106973795A | 公開(公告)日: | 2017-07-25 |
| 發明(設計)人: | 呂秀立;尹麗娟;郭小芳;施季森;沈烈英 | 申請(專利權)人: | 上海市園林科學規劃研究院 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 上海驍象知識產權代理有限公司31315 | 代理人: | 趙俊寅 |
| 地址: | 200232 *** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 誘導 厚葉巖 白菜 體細胞 胚胎 方法 | ||
1.一種誘導厚葉巖白菜體細胞胚胎的方法,其特征在于:包括如下步驟:
1)誘導愈傷組織:取無菌試管苗形態學上端第二對、第三對葉片,修剪葉片邊緣出現傷口,葉片遠軸面朝下放于MS+2,4-D 0.1~1.0 mg/L+KT 0.01~0.1 mg/L+VC 0.05~1.0 mg/L培養基上,黑暗培養,培養25~35天;
2)增殖愈傷組織:剝離誘導出的愈傷組織,轉接入增殖培養基MS+ZT 0.5~2.0 mg/L+NAA 0.01~0.1 mg/L+VC 0.05~1.0 mg/L,黑暗培養,培養25~35天;
3)誘導體細胞胚胎:將愈傷組織轉接入誘導培養基MS+ZT 0.1~2.0 mg/L+IBA 0.01~0.1 mg/L+VC 0.05~1.0 mg/L,黑暗培養,培養55~65天,誘導出體細胞胚胎后,再轉移至光照下培養。
2.根據權利要求1所述的一種誘導厚葉巖白菜體細胞胚胎的方法,其特征在于:誘導愈傷組織的最佳培養基為MS+2,4-D 1.0 mg/L+KT0.1 mg/L+VC 0.5 mg/L,黑暗培養30天最佳。
3.根據權利要求1所述的一種誘導厚葉巖白菜體細胞胚胎的方法,其特征在于:愈傷組織增殖的最佳培養基為MS+ZT 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+VC 0.5 mg/L,黑暗培養30天最佳。
4.根據權利要求1所述的一種誘導厚葉巖白菜體細胞胚胎的方法,其特征在于:誘導體細胞胚胎的最佳培養基為MS+ZT 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+VC 0.5 mg/L,黑暗培養60天最佳。
5.根據權利要求1所述的一種誘導厚葉巖白菜體細胞胚胎的方法,其特征在于:上述各種培養基中的pH值均為5.6~5.9,蔗糖的質量百分比濃度均為2.5%~3.5%,瓊脂的質量百分比濃度均為0.55%~0.75%。
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